《Streptomyces sp.4353中3-氨基-5-羟基-苯甲酸(AHBA)合酶基因的克隆及其在大肠埃希菌中的表达》.pdfVIP

·24· Streptomyces 合酶基因的克隆及其在大肠埃希菌中的表达 武临专1 划爱明m 玛奏燕1,2韩锋1,2张套霹1 高群杰t 王以兜b+ (1中阑医学科学院中国协和医科大学 医药生物技术研究所， 卫生部抗生素生物工程重点实验宽， 北京100050； 2沈聚药耪犬学。淀鼯110016) 摘要： 曩的克羟Streptomyces 基因凌磷酸薅基因逶常连镂，形戎一令AHBA生物会成基嚣簇。本文遴过分辑、毙较恶熬AHBA生貔合戒基嚣簇翡基因缀织结梅特 AHBA合酶基因部分序列的基础上。通过PCR 点和序列保守性，设计引物，以Streptomycessp．4353的总DNA为模板，在已知737bp AHBA合酶慕因在犬肠埃希菌BL21．CodonPlus(DE3)．RIL中进行表达和SDS j佥测。缡果从Streptomycessp．4353中得到了 g-段(NCBI 一段2872bp大夺熬DNA 一致鹣蛋鑫表达特舅条警。结论 Streptomyces 因的功能奠定了基础。本研究克隆得到的2872bp 生糖会或。 关键词： AHBA合酶；基因克隆与表达；链霉菌4353 审圈分类号：Q78 文藏檬莰璃：矗 of 3-amino-5-hydroxybenzoicgene Cloning its inE。coli from and Streptomycessp．4353 expression Wu Lin-zhuan‘，Liu Ai—ruing憾MaChun-yanl”，HanFen91”， Hui—tul．Gao and Yi—guan91 Zhang Qun-jiel Wang of of of ofMedicinal (1 Health；Institute KeyLaboratoryBiotechnologyAntibiotics，Ministry Bioteehnology, CAMS＆PUMC，Beijing100050； 2 Pharmaceutical 110016) Shenyang University。Shenyang of from ABS薯RA甜ObjectiveCloning3-amino-5一hydroxybenzoicacid《AHBA)synthasegene andits in是coli．MethodFive foramino sp．4353 expression genes，玉e．genesDHQ shikimate and involvedinAHBA dehydrogenase，AHBAsynthase，oxidoreductasephosphatase，all asallAHBA were to the and linked cluster．Primers usually