尼古丁与BSA相互作用的光谱研究.pdfVIP

第25卷，第10期 2005年10月 a11d spectroso。pySpectralJ气砌ySis 尼古丁与BSA相互作用的光谱研究 陈 韵，孔祥荣，沈星灿，梁 宏。 广西师范大学无机化学研究所，生物化学化工学院，广西桂林541004 用。荧光研究表明，尼古丁浓度的增加引起琰认345 m处荧光有规律地猝灭。st锄一Vdmer方程分析pH 5．0，pH7．4和pH11．0体系的荧光猝灭机理发现，pH5．0体系属动态猝灭，而pH7．4和pH11．0体系为 11．0体系在温度为20和37℃条件下尼古丁和 静态猝灭。LineⅥ删小Burk双倒数方程计算pH7．4和pH L· Ⅸ波的结合常数忌分别为：忌20℃=140．15L·lnol～，忌37℃=131．83L·nlol。(pH7．4)和忌20℃=141．76 rnol～，愚，，℃=27．79 7．4条件下尼古丁浓 小，推测是由于不同pH下尼古丁存在的不同形态所致。紫外一可见光谱研究表明，pH 度的增加引BsA在210m处吸收峰吸收强度减小且红移，说明BSA二级结构发生变化，即螺旋结构变松 散；紫外二阶导数光谱和同步荧光光谱(△|=【=A。一A。=15m和猷=A。一k=60m)分析尼古丁对 酸残基微环境由疏水环境转变为亲水环境。 · 主题词尼古丁；血清白蛋白；光谱研究 中图分类号：512+．1文献标识码：A 文章编号：1000—0593(2005)10一1652—06 引 言 1实验部分 尼古丁(Ni00tine)又称烟碱，即1一甲基一2一(3一吡啶基)吡1．1仪器和试剂 咯烷，是烟草中的一种主要生物碱，也是致人吸烟上瘾的关 Cary 键性因素。研究表明，尼古丁可导致Edi343／113PoA+和 Edi1787PoiA的DNA损伤H1；抑制白细胞的生长和合 成怛1；导致小鼠染色体异常∞J。有证据表明尼古丁和其它致 癌物在引起癌变过程中起协同作用H剖。血清白蛋白是血浆 中含量最丰富的蛋白质，它能结合、运输许多内源性和外源 经进一步纯化。使用时用缓冲溶液配成浓度为1．0×10。 性化合物‘7|。在已有烟瘾人体血液中，尼古丁浓度达到10～ 15 ng·mL。1【8J。研究尼古丁与血清白蛋白相互作用有助于了 雠州ICS公司，用缓冲溶液配成浓度为1．0×101H101·L～， 解尼古丁的生理效应，而相关的研究很少见报道旧J。本文用 1．0×10。2 mol·L～，1．0×10-4 荧光光谱研究了尼古丁在不同pH环境下对Ⅸ迪的荧光猝灭 机理及结合常数，表明因不同pH环境下尼古丁和ⅨA形态 }ICl，N扣lH调配，并在SarlD五us 不同导致荧光猝灭机理各异及结合常数随温度变化的敏感性 密测定。所有工作溶液保持NaCl浓度为O．1 不同；紫外一可见光谱研究发现尼古丁与BsA作用可引起 二次去离子水新鲜配制。 Ⅸ迟二级结构的变化；同步荧光光谱及紫外二阶导数光谱研 1．2实验方法 究结果表明：高浓度的尼古丁使Ⅸ浚芳香性氨基酸(Trp，1．2．1荧光光谱及同步荧光光谱测定 Tyr和Phe)残基微环境由疏水环境转变为亲水环境。 取10支10 收稿日期：2004一05—16。修订日期：2004—08—26