实验二维生素C的测定.ppt

烟大化院 贺君 实验二 VC 含量测定 Vc的常识 人类营养最重要的维生素之一 缺少：坏血病——抗坏血酸（ascorbic acid） 调节物质代谢 增强机体对肿瘤的抵抗力、阻断化学致癌物 不饱和多羟基物，水溶性维生素 植物绿色部分、水果（如橘子、苹果、草莓、山楂等）、蔬菜（黄瓜、洋白菜、西红柿等）中的含量更为丰富 Vc的发现 经历漫长过程 坏血病在历史上曾严重威胁人类健康 特别是对海员，探险家，军队——“水手的恐怖” 1747年，英海军军医林德：远航者多吃柠檬，再未发生 1934年，人工合成Vc Vc作用 促进抗体的形成,提高免疫力（还原性） 促进铁的吸收：Fe3+→Fe2+（易吸收） 促进四氢叶酸形成、维持巯基酶的活性；促进叶酸还原，对 巨幼红细胞性贫血有一定疗效 参与羟化反应,促进胶原合成；预防坏血病、牙龈出血；促 进伤口愈合,治疗外伤,灼伤,加速手术后的恢复；增强皮肤 弹性,预防色斑 清除体内自由基,延缓衰老 Vc作用 促进类固醇羟化,降低血液胆固醇,减少血栓发生 促进有机物或毒物羟化解毒,使酶的活性升高,增强药物或毒 物的解毒过程,增强治疗尿道感染的药物疗效 解重金属毒性 防止致癌物质亚硝基胺的形成, 预防癌症 促进神经递质合成 Vc作用 注意！ 长期服用维生素，会给人体带来隐患 原因： 人体逐渐适应高剂量维生素 停用，可能出现维生素缺乏症 Vc定量测定方法 一.氧化还原法 1. 直接碘量法 2. 2,6-二氯酚靛酚滴定法 二.分光光度法 1.紫外快速测定法 2.2,4-二硝基苯肼法 3.高铁还原法测定血浆中的抗坏血酸 五.荧光分析法 1.Vc的微量荧光测定法 2.Vc总量的荧光测定 三.光电比浊法 四.电化学法 DCPIP 一、实验目的 1、学习Vc定量测定的原理、方法 2、微量滴定管的使用、滴定基本操作技术 3、了解植物组织中Vc的含量测定 Vc具强还原性：还原性、脱氢型 还原型Vc→→→还原染料DCPIP ，本身氧化为脱氢型 DCPIP：酸性溶液红色，还原后无色 Vc全部被氧化→→→多余染料使溶液成粉红色 无色→→→微红色：溶液Vc全部氧化→→→滴定终点。 二、实验原理 三、实验器材 材料：豆芽 纱布（粗过滤） 电子分析天平（称量材料） 研钵（粉碎材料） 移液管：1.0ml、10ml 容量瓶（定容） 微量滴定管 四、实验试剂 Vc标准液（1mg/ml） 0.1% DCPIP 1% HCI 五、实验操作 1、 DCPIP浓度的标定 标准Vc 2ml 1% HCI 3ml 0.1% DCPIP 滴定至粉红色，15s不褪色 记录体积（2～3份平行） 2、松针Vc含量测定 松针 10g（精确至0.1g） 洗净、沥干 少量1% HCI 研磨 静置 2～4层纱布过滤 定容（容量瓶） 1）Vc的提取 2）样品提取液Vc含量测定 样品提取液 10ml 滴定至粉红色，15s不褪色 记录体积（2～3份平行） 0.1% DCPIP 六、计算 VA：滴定样品消耗染料的平均体积（ml） VB：滴定空白耗用的染料的平均体积（ml） C：样品提取液的总体积（ml） D：滴定时所取的样品提取液体积（ml） T：1ml染料相当于Vc溶液的量（mg） W：待测样品重量（g） 七、注意事项 操作过程迅速，防止还原型Vc氧化 滴定过程 2min 滴定所用染料：1～4ml 酌情增减样液用量、改变提取液稀释度 浆状物泡沫太多，可加数滴丁醇或辛醇 实验必须在酸性条件下进行（干扰物反应慢） 防止滴定管漏液、气泡 维生素C含量排行 油麦菜 20.00 毫克 冬寒菜 20.00 毫克 海棠果 20.00 毫克 山楂 19.00 毫克 长豆角 19.00 毫克 茼蒿 18.00 毫克 卷心菜 16.00 毫克 土豆 16.00 毫克 蚕豆 16.00 毫克 荷兰豆 16.00 毫克 柑橘类水果、番茄是维生素C的最佳来源，清椒、菠菜、马铃薯中含量亦丰 烟大化院 贺君