《9电泳.》.docVIP

第九讲 电泳 2学时 电泳的概念 电泳的基本原理 电泳技术的分类 基本的电泳系统组成 常规聚丙烯酰胺凝胶电泳的分离原理 SDS PAGE的分离原理 何谓等电聚焦？如何形成载体两性电解质pH梯度？ 何谓双相电泳？其作用是什么？ 三、电泳技术 1、电泳概念 Arne Tiselius——物理化学家、诺贝尔奖金获得者 定义——荷电的胶体粒子在电场中的移动； 电泳决定于环绕每个离子的离子雾中的扩散双电层，离子尺寸越大、溶液中的离子强度越高时，电泳现象变得越明显。因此，电泳现象中的表面电势和双电层的因素起着决定性的作用。 2、电泳的原理 蛋白质、核酸、多糖等常以颗粒分散在溶液中，它们的净电荷取决于介质的H+浓度或与其它大分子的相互作用。 带电粒子在电场中的迁移方式主要依据分子尺寸大小和形状、分子所带电荷或分子的生物学与化学特性。 3、电泳迁移率 电泳迁移率（mobility）:在电位梯度E的影响下，带电颗粒在时间t中的迁移距离d。 其单位是cm2·sec-1 ·V-1 电泳迁移率的不同提供了从混合物中分离不同物质的基础 4、电泳的大致分类 依据电泳原理，现有三种形式的电泳分离系统 （1）移动界面电泳（moving boundary electrophoresis） （2）区带电泳（zone electrophoresis ） （3）稳态电泳（steady state electroph