专题课题酵母细胞的固定化(ppt).ppt

* 课题3　酵母细胞的固定化 一、固定化酶的应用实例——生产高果糖浆 1.反应原理:葡萄糖 果糖。 2.葡萄糖异构酶的优缺点: (1)优点:这种酶的_______较好,能持续发挥作用。 (2)缺点:酶溶解于葡萄糖溶液后,无法从糖浆中回收,造成很大 的浪费。 _____________ 葡萄糖异构酶 稳定性 3.使用固定化酶的生产原理:将葡萄糖异构酶固定在颗粒状的 _____上,再将这些酶颗粒装入_______中,柱子底端装上分布着 许多小孔的筛板。_______无法通过筛板上的小孔,而_______ ___可以自由出入。 4.生产操作: (1)将_______溶液从反应柱的上端注入。 (2)使葡萄糖溶液流过反应柱,与___________________接触。 (3)转化成的果糖,从反应柱的下端流出。 载体 反应柱 酶颗粒 反应溶 液 葡萄糖 固定化葡萄糖异构酶 二、固定化技术的方法 1.固定化酶和固定化细胞技术的概念:是指利用物理或_____ _____将酶或细胞固定在一定空间内的技术。 2.常用的方法:包埋法、___________和物理吸附法。 (1)酶适合采用化学结合法和___________固定化,而细胞多采 用_______固定化。 (2)包埋法固定化细胞是将微生物细胞均匀地包埋在不溶于水 的___________中。常用的载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、 醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等。 化学 方法 化学结合法 物理吸附法 包埋法 多孔性载体 三、固定化酵母细胞实验操作 1.酵母细胞的活化:向盛有干酵母的小烧杯中加入_______,让 处于_____状态的酵母菌恢复正常的生活状态。 2.配制CaCl2溶液:配制物质的量浓度为0.05 mol·L-1的_____ 溶液。 3.配制海藻酸钠溶液:用酒精灯加热时,边加热边_____,要用小 火,或者_________,直至完全溶化。 蒸馏水 休眠 CaCl2 搅拌 间断加热 4.海藻酸钠溶液与酵母细胞混合:将溶化好的海藻酸钠溶液冷 却至室温,加入已活化的酵母细胞,进行充分搅拌,使其混合均 匀,再转移至_______中。 5.固定化酵母细胞:以_____的速度缓慢地将注射器中的溶液滴 加到配制好的_________中,浸泡___min左右。 6.用固定化酵母细胞发酵:将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用 _______冲洗2～3次,放入用于发酵的葡萄糖溶液中,再置于 25℃下发酵24 h后,会发现有_____产生,同时有酒味散发。 注射器 恒定 CaCl2溶液 30 蒸馏水 气泡 【思考辨析】 1.判断正误 (1)酶的固定化提高了酶的催化效率。( ) 【分析】酶的固定化使酶能够反复利用,提高了酶的利用率, 但并未提高酶的催化效率。 (2)柱子底端分布着许多小孔的筛板属于半透膜。( ) 【分析】半透膜是只允许离子和小分子自由通过的膜结构。 葡萄糖异构酶已经被固定在载体上,与反应溶液的分离属于 较大固体颗粒与液体的分离,已超出半透膜分离溶质分子的 范畴。 × × (3)固定化酵母常采用化学结合法和物理吸附法。( ) 【分析】化学结合法和物理吸附法是固定化酶常采用的方法, 固定化酵母一般采用包埋法。 (4)酵母细胞的固定化可提高发酵产品的质量。( ) × √ 2.问题思考 (1)固定化酶和固定化酵母在营养物质提供方面有何差别? 提示：固定化酶不需要提供营养物质,固定化酵母需要提供营养物质以保证酵母菌存活。 (2)如果制作的凝胶柱颜色过浅,呈白色,则说明了什么? 提示：说明海藻酸钠浓度偏低,固定的细胞数目少。 一、直接使用酶、固定化酶、固定化细胞催化的比较 是 否 否 是否需要 营养物质 包埋法 化学结合法、 物理吸附法 制作 方法 一系列酶 一种 一种或几种 酶的 种类 固定化细胞 固定化酶 直接使用酶 成本低,操作更容易 被固定的酶可重复使用 催化效率高、低耗能、低污染等 优点 小分子 各种物质(大 分子、小分子) 各种物质(大分子、小分子) 反应 底物 一系列 单一 单一或多种 催化 反应 固定化细胞 固定化酶 直接使用酶 固定后的细胞与反应物不容易接近,尤其是大分子物质,可能导致反应效率下降等 一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成都是通过一系列的酶促反应才能得到的 ①溶液中的酶不能回收利用,增加了生产成本 ②反应后酶会混在产物中,可能影响产品质量 缺点 固定化细胞 固定化酶 直接使用酶 【易错提醒】有关固定化细胞与固定化酶的两点提醒 (1)固定化细胞使用的都是活细胞,应该为其提供一定的营养物质,而固定化酶不需要。 (2)固定化细胞由于固定的是完整的细胞,因而酶的环境较稳定,所以对酶的活性影响较小,更能抵抗外界环境的变化。