临床检验基础实验指导.doc

实 验 一 血液一般检验（一）General Examination of Blood 【内容】 1、皮肤采血法（毛细血管采血法） 2、血红蛋白(微量)吸管 3、静脉采血法 4、血红蛋白测定 5、红细胞计数 6、细胞计数池的正、侧面观察 7、正常及异常红细胞形态(示教) 【目的要求】 掌握红细胞直接计数，血红蛋白测定的标本送检要求、原理、操作方法、参考值及临床意义。 2、掌握皮肤采血法（毛细血管采血法）及血红蛋白(微量)吸管的使用方法。 3、熟悉静脉采血（collection of venous blood）的方法和无菌操作技术。 4、熟悉细胞计数池的结构及应用范围。 【器材】 721-型分光光度计，血细胞计数板，血红蛋白吸管，75％酒精棉球及干棉球，三棱针，玻棒及试管，显微镜。 【试剂】 1、HicN试剂的配制 氰化钾 50mg 高铁氰化钾 200mg 无水磷酸二氢钾 140mg Triton×—100 1.0ml 蒸馏水 加至1000ml，纠正pH至7.0-7.4。 此液为淡黄色透明溶液，贮存在棕色有塞玻璃瓶中，放40C冰箱保存，一般可用数月。 2、赫姆(Hayem)液： 氯化钠 1.0g 结晶硫酸钠(Na2S04·10H20)5.0g(或无水硫酸钠2.5g) 氯化高汞 0.5g 蒸馏水加至200ml 溶解后加20g/L伊红水溶液1滴，过滤后用。 【实验】 一、皮肤采血法（毛细血管采血法） 【器材】 1、三棱针，预先高压消毒，每人每次采血更换1次性采血针以避免交叉感染。 2、消毒干棉球。 3、75％乙醇棉球 4、20u1吸管 【操作方法】 1、采血部位以左手无名指为宜。 2、轻轻按摩采血部位，使其自然充血，用75％乙醇棉球消毒局部皮肤，待干。 3、紧捏刺血部位，用无菌刺血针迅速刺入皮肤约2—3mm，让血液自然流出，如血液不流出可在其周围轻轻加压，但不要过重。 4、用干棉球擦去第一滴血、按需要依次采血。 5、采血完毕，用干棉球压住伤口，止血片刻。 6、血红蛋白吸管的使用：在采血前首先练习一下吸管使用，使其达到得心应手。 二、 血红蛋白(微量)吸管的使用 【原理】 挤压乳胶吸头，使刻度微量吸管内产生负压而吸取液体。 【器材】 微量吸管、乳胶吸头、干脱脂棉。 试管、试管架。 2ml吸管、吸耳球。 【试剂】 洗涤液3管（蒸馏水、95%乙醇、乙醚）。 生理盐水。 【操作方法】 准备吸管及试管 将乳胶吸头套在微量吸管上，注意两者连接处应严密不漏气。试管上应贴上患者姓名或门诊/住院号标签。 加稀释液 取试管1支，加生理盐水2ml。 持管吸血 右手拇指和中指夹住吸管与吸头交接处，示指盖住吸头小孔。三指轻微用力，排出适量的气体使管内形成负压。将管尖插入抗凝血，三指慢慢松开，吸取抗凝血到所需刻度后抬起示指。注意吸血时管尖始终不要离开液面，以免吸入气泡；也不要用力过度，将血液吸入乳胶吸头内。 拭净余血 用干脱脂棉沿吸管口方向拭净余血，并检查血量是否达到规定刻度。 释放血液 将吸管插入含生理盐水的试管底部，慢慢排出吸管内的血液，再用上清液冲洗管内余血3次，最后将管内残余液体完全排净。 洗涤试管 依次用蒸馏水洗净，95%(V/V)乙醇脱水，乙醚干燥。如为一次性微量吸管，可省略该步骤。 【注意事项】 准备吸管 吸管和胶吸头连接处应严密不漏气，挤压吸头力度应适宜。 持管吸血 吸血时动作宜慢，防止血液吸入乳胶吸头内；避免产生气泡。 3. 拭净余血 吸血后拭净管外余血以保证血量准确。 三、静脉采血法 【原理】 使用注射器或负压采血器刺入浅静脉后，用负压吸取所需血量。 【器材】 消毒棉签。 压脉带（止血带）2~3mm口径的橡皮软管。 一次性消毒注射器 针头：30~40mm长，18号、19号、20号带斜面。若采集5岁以下儿童的血液标本，使用23号或25号针。 注射器：可选用2ml、5ml、10ml或20ml注射器。 一次性负压采血器。 试管 含或不含抗凝剂，并应有采血量的标记（如5ml刻度）。 垫枕。 【试剂】 30g/L碘酊、75%（V/V）乙醇或碘伏。 抗凝剂（根据实验项目选择所需的抗凝剂）。 【操作方法】 准备试管 仔细阅读受检者申请单，决定采血量，准备每个试验所需的试管，并应按一定顺序排列，如患者仅做凝血试验一项，最初1ml血液必须丢弃。如做红细胞沉降率测定，需取试管1支，加入适量抗凝剂（109mmol/L 枸橼酸钠0.4ml）