核酸血液筛查(上海浩源).pptVIP

核酸血液筛查相关技术 P* * dUTP-UNG优缺点 缺点 优点 Text Text 防止含dU产物的污染 不影响目的片段的扩增 作用条件简单，易实现。 只防自身产物的污染，不防天然产物的污染。 若混有核酸酶，会同时分解目的产物。 UNG致使CT值增加，易导致假阴性。 dUTP在对GC丰富的模板时作用不大。 灭活不够完全。 相对用dTTP，成本高。 核酸血液筛查相关技术 P* * 内对照分子 Text Text 内参照的概念 人工合成的小片段DNA，放在反应液中和待测目的基因一起扩增。 内对照是PCR方法检测疾病基因的必需成分，是防止假阴性、提高检测结果可靠性的重要标示。 内对照对整个实验流程，包括样品提取、分装、PCR热循环仪孔间差、PCR抑制元素等等可能的影响因素进行监控，防止假阴性，提高安全性 核酸血液筛查相关技术 P* * 竞争性内对照分子 3’ 5’ 5’ 3’ 3’ 5’ 1 20 291 310 (BP) 两端为特异性引物 目的基因片段 内对照顺序 竞争性内对照的概念 与目的基因使用相同的引物。 扩增产物序列与目的基因不同，可用不同的探针检测。 核酸血液筛查相关技术 P* *