鸭MHCⅠ和β2m基因的表达和纯化及蛋白二级结构分析.pdf

摘要 I相关四聚体技术，本文表达与纯化了鸭MHCI和132m基因并测定了其蚩白二级结构。根据 Anpl-MHC1年¨Anpl-[j2m基冈序列设计了引物对，皿克隆了三类Anpl。MHC1基因的胞外区和 1-BSP)。结果分别得到了三类861 I的羧基端(Anpl-MHC bp、864bp和864bp的Anpl-MHC I C端。 基闻序列止确地加到了Anp／-MHC 随后，将AnpLMHC Ecoli TBl中进行了可溶性表达。麦芽糖结合蛋白(MBP)重组Anpl-MHCI-BSP和Anpl-p2m蛋 I-BSP*UAA01、MBP．MHC 白被分别命名为MBP—MHC I-BSP*UCA01、MBP．MHCI-BSP*UDA01 和MBP-132m。SDS分析显示三类Anpl-MHC 果均在相应的73．4kDa和53．2kDa处出现特异带。随后将融合蛋白进行FactorXa蛋白酶切鉴定， 结果显示融合蛋白都能被正确切割为MBP单体和Anpl-MHCI-