电针对兔膝骨关节炎软骨中βcatenin表达的影响.pdfVIP

电针对兔膝骨关节炎软骨中13-catenin表达影响 摘要 ㈣㈣㈣㈣㈣ 86 、12咝1 疾病，OA的主要病理改变发生于关节软骨，其可导致关节软骨从变性到 破坏到最终的骨赘形成的进行性改变，严重影响患者的生活质量。传统的 MMP一9等蛋白酶类的产生过多有关，然而相关基因敲除的小鼠动物实验并 没有为此提供有力证据，在临床治疗中，应用抗炎药物及蛋白酶类抑制剂 也没有取得好的疗效。因此，OA的发病机制还需要进一步阐明。近年来 用。已有动物实验表明：特异性增加小鼠膝关节软骨细胞中p-catenin表达， 信号通路可能与动物OA的发生有关。OA的治疗可以分为手术治疗和非 手术治疗，其中电针治疗是临床上常用的一种非手术治疗方法。电针治疗 将传统的针灸与电刺激结合起来，针灸可刺激OA患者穴位，促进机体释 放镇痛物质，而电刺激能使肌肉收缩，改善局部血液循环，有利于损伤的 修复。因此，本实验应用电针治疗膝OA的动物模型，通过肉眼和HE染色 观察关节软骨形态变化和软骨细胞病理改变、免疫组化方法比较治疗前后 兔膝OA动物模型的作用机制。方法：(1)材料和干预措施：健康新西兰 大白兔36只(雌雄不限)，随机分为三组，正常对照组12只，不作任何 直位用石膏固定以建立OA模型。电针治疗组在造模6w后，患膝关节行电 针治疗，选取兔左下肢足三里、梁丘、内膝眼、外膝眼四个穴位，每天同 15d后空气栓塞法处死三组动物，打开左膝关节进行大体观察，再以锐利 刀片切取股骨内髁内侧带软骨下骨质的软骨标本，使其呈约0．5cm0．5cm ×0．5cm全软骨组织块，制作切片后行HE染色、免疫组化检测及光镜观 察。按改良的Mankin’S评分标准为切片评分，将所得评分及检测数据进 行统计学分析。(2)观察指标：①肉眼观察三组兔左膝关节大体形态变化， 并进行关节软骨的改良Mankin’S评分；②切取少许兔左膝关节股骨内侧髁 软骨后于10％中性甲醛溶液固定、石蜡包埋、切片，并作HE染色后，在光 镜下观察软骨细胞形态的变化，并按照改良的Mankin’S评分标准对各组的 IBMSPSSStatistics19．0。所得计量数值采用；±S表示，P0．05为差异 具有显著性，尸0．01为具有显著性差异。结果：(1)各组膝关节软骨大 体观察：正常对照组，左膝关节内未见明显关节腔积液，股骨内侧髁软骨外 观表面光滑，呈蓝白色、明亮且无明显裂纹；按改良Mankin’S评分标准， 各组软骨的软骨结构评分0分。模型组12只兔软骨光泽度和透明度降低， 色淡黄，部分软骨表面有小的裂隙及异常突起，关节面较粗糙，大部分关 节腔内可见明显积液。软骨结构按改良的Mankin’S评分结果3只为2分， 6只为3分，3只为4分。电针治疗组仅4只可见关节腔内积液，且量较模 型组少，部分软骨表面有少许溃疡，软骨表面光滑，光泽度较正常对照组 只为3分。将各组的改良Mankin’s软骨结构评分结果进行统计学比较，具 HE染色示软骨表面平整光滑，软骨层厚薄均匀，基质着染均匀，软骨细胞 大小一致、整齐排列且潮线十分完整，按改良的Mankin’s评分标准对软骨 细胞及潮线完整性进行评分，得分均为0分。模型组染色显示关节软骨表 层出现溃烂、缺失，且软骨厚度变薄、层数减少，软骨细胞成团聚集，形 状不规则，潮线紊乱。软骨细胞改良Mankin’S评分5只2分，7只3分， 针治疗组染色显示软骨层较正常组变薄，但较模型组厚，软骨表面较模型 组光滑，少部分有小的裂隙形成，但裂隙局限在软骨表层，软骨细胞较饱 满，形态规则，小部分软骨切片偶见少数软骨细胞聚集，潮线较正常组紊 许浅黄褐色颗粒。结论：(1)采用膝关节伸直位管形石膏制动6周能较好 达高于轻度受损的软骨。(3)电针治疗能减轻关节软骨的受损程度，其机 基因转录有关。 关键词：骨关节炎；软骨细胞；电针；13-catenin on rabbitkneeosteoarthritis Electro-acupuncturetherapy