利用AFLP分子技术对我国三疣梭子蟹群体（Portunus trituberculatus）的遗传多样性研究.pdfVIP

中文摘要 三疣梭子蟹是我国重要经济蟹类之一，肉质细嫩，脂膏肥满，味道鲜美，营 养丰富。但是，由于过度捕捞，梭子蟹自然种群逐渐衰退。本研究分别以渤海地 区三疣梭子蟹野生和养殖群体以及渤海、黄海、东海野生群体为研究对象，采 用当前最有效的分子标记手段AFLP技术分析其遗传多样性及遗传分化情况，从 而了解三疣梭子蟹生存和种质资源状况，为避免资源衰竭，确保有足够数量进行 繁殖以及可持续利用，良种选育等提供基础性依据。 作者于2006．2007年用拖网分别从渤海湾天津海域采集了野生三疣梭子蟹 30只，从青岛(黄海海区)和浙江舟山市莲花岛(东海海区)各采集了20只。 样本经AFLP技术分析后，结果参考砒廿D标记数据分析方法，将AFLP标记作 行结果分析。选择电泳后选择清晰的扩增片段进行数据统计，在相同迁移位置按 每一个体扩增片段的仃光．fl：观扩增带记求为1．￡扩增带记求为2，个体每个 扩增片段的等位基因数默认为2，输入TFPGAl．3软件计算以下参数：多态位点 数，多态位点百分率，杂合度，种群间遗传近交系数FSt并根据遗传距离绘制 UPGMA聚类图。将电泳图谱中扩增条带的有无转化为0，1原始数据矩阵采用 等参数。主要结果和结论如下： 1．利用5对选择性引物对我国渤海地区三疣梭子蟹野生群体和养殖群体各 30个个体进行了初步研究。五组引物共扩增出156个等位位点，多态位点99个。 平均每组引物扩增出31．2个等位位点，其中19．8个多态性位点，占等位位点总 数的63．46％。采用TFPGAl．3软件计算出两群体多态位点数，平均多态位点百 O．2317，O．1987，两群体遗 分率及杂和度，分别为96，85；61．94％，59．44％； 传近交系数为O．1265。说明群体内的总的遗传分化中有12．65％是来自群体间的 别为：O．2372，O．2052。群体间遗传分化度Qf为O．1035。由以上结果可以看出， 渤海地区三疣梭子蟹养殖群体与自然群体遗传多样性基本处于同一水平，两群体 间出现了一定的遗传分化，但与群体内的变异比较，群体问的变异相对较小。 ．． 生塞摘墨 亟±堂焦诠室 2．利用lO对选择性引物组对我国三疣梭子蟹渤海、黄海和东海三个群体共 60个个体进行了遗传多样性分析。共扩增出466个位点，多态位点360个。平 均每对引物扩增出46．6个等位位点，其中36个是多态性位点。利用TFPGAl．3 和PopG黜1．31两种软件分析了群体内的遗传变异和群体间的遗传结构，计算不 同地理种群的遗传距离，用UPGMA法构建了三个群体的系统发生树。渤海， 黄海和东海群体的多态位点比例，Nei基因多样性指数和Shallnon’s遗传多样性 0．3822，O．3688。三个群体的遗传多样性均处于同一水平。群体间遗传分化系数 (b、Shannon’s遗传多样性信息指数表明，群体的遗传变异主要来源于群体内个 体间。UPGMA聚类图显示黄海与东海先汇为一支再与渤海相汇，遗传距离显示 黄海与东海为一个群体。 及E．AAC／M．CCT3组AFLP选扩引物对07年采集的渤海野生三疣梭子蟹30个个 体进行了霞复性实验。引物组E．ACG，IⅥ．CAG对两次提取的基冈组DNA分别进行 了龉次AFLP流程的重复，另两组引物分别肘同批次提取的基因组DNA进行了四 次AFLP流程的重复。三组引物四次重复结果误差很低，经统计学检测，差异不 显著。 关键词： 三疣梭子蟹AFLP分子标记 遗传多样性 lI Abstract The ccorlomical ClliIla PD，伽玎淞护泐6e，．c肠f‘岱is觚iInport锄tspIeci懿in bcCauseofits t嬲te锄d删tritionalValueswllich good h嬲be吼锄iII】印rt锄touq)ut of 0ne its㈣efc