流式细胞检测技术讲座.pptVIP

FACSAria光学滤片 检测器排列 （激光器） 光电倍增管 BP滤光片 可用染料 八角形 （488nm蓝色激光） A 780/60 PE-Cy7 B 695/40 PerCP-Cy5.5, PerCP C 610/20 PE-Texas Red D 575/26 PE E 530/30 FITC 三角形 （633nm红色激光） A 780/60 APC-Cy7 B 660/20 APC 三角形 （407nm紫色激光） A 530/30 Alexa Fluor 430 B 450/40 Cascade Blue, Pacific Blue, DAPI, Hoechst, Alexa Fluor 405 荧光染色对照 阳性对照 使用已知阳性样本，帮助排除试剂的质量、浓度、特异性以及染色方法等因素 阴性对照 空白对照（自发荧光） 自发荧光，即不经荧光染色细胞内部荧光分子经光照发出的荧光。自发荧光信号为噪声信号。一般说来，细胞成分中能产生自发荧光的分子（核黄素、细胞色素等）的含量越高，自发荧光越强，如肿瘤细胞、粒细胞等；样本死细胞比例越高，自发荧光越强。 实验样本（自发荧光＋特异荧光＋非特异荧光） 特异荧光，即抗体F(ab’)2段与细胞抗原特异结合上的荧光染料受光照发出的荧光 非特异荧光，即抗体Fc段与细胞表面的Fc受体非特异结合上的荧光染料受光照发出的荧光 同型对照（自发荧光＋非特