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基础课时案42 生物技术在其他方面的应用 2016备考·最新考纲 1.血红蛋白的提取与分离。2.从生物组织中提取某些特定成分。3.实验:DNA的粗提取与鉴定。 一、DNA的粗提取与鉴定 1.基本原理 2.操作过程 材料的选取:选用 含量相对较高的生物组织 破碎细胞(以鸡血为例):鸡血细胞,加 ,用玻璃棒搅拌,用纱布过滤,收集滤液 去除杂质:利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同,通过控制 去除杂质 DNA析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等的、 冷却的体积分数为 溶液 DNA的鉴定:在溶有DNA的溶液中加入二苯胺试剂, 5 min,溶液变成蓝色 易错警示! (1)本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料,原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。 (2)实验中两次使用蒸馏水,第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA,第二次的目的是稀释NaCl溶液,使DNA从溶液中析出。 (3)二苯胺试剂要现配现用,否则二苯胺会变成浅蓝色,影响鉴定效果。 深度思考 下图为“DNA粗提取和鉴定”实验的相关操作,请仔细观察并分析①~④操作的目的分别是什么? ①________________ ②________________ ③________________ ④________________ 提示 ①是使鸡血细胞吸水涨破释放出核物质;②是析出DNA,去除溶于酒精的杂质;③是使DNA溶解在2 mol/L NaCl溶液中;④是稀释NaCl溶液使其浓度接近0.14 mol·L-1,去除溶于低浓度NaCI溶液的杂质。 二、PCR技术的基本操作和应用 1.PCR原理 DNA 原理,即: 2.PCR反应过程 (1) :当温度上升到 以上时,双链DNA解旋为单链。 (2) :温度下降到 左右时,两种 通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。 (3) :温度上升到72 ℃左右时,溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在 的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。 三、血红蛋白的提取和分离 1.方法及原理 2.血红蛋白的提取和分离过程 深度思考 1.相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程可表示为①~④中的哪一种? 提示 ②,分子质量较大者先洗脱出来,分子质量较小者后洗脱出来。 2.如图所示装置可用于血红蛋白提取、分离的哪种过程?其原理是什么?烧杯内a溶液是蒸馏水吗? 提示 该装置为透析装置,由于透析袋是用硝酸纤维素制成的小分子可自由进出,而大分子保留在袋内,故可用于除去小分子杂质,烧杯中的a溶液应为20 mmol·L-1的磷酸缓冲液,不可使用蒸馏水。 四、植物有效成分的提取 1.植物芳香油的提取 (1)提取玫瑰精油实验 ①方法: 。 ②实验流程 (2)提取橘皮精油的实验 ①方法:一般用 。 ②实验流程 石灰水浸泡→漂洗→ →过滤 橘皮油←再次 ←静置 2.胡萝卜素的提取 (1)胡萝卜素的性质:不溶于 ,微溶于乙醇,易溶于 等有机溶剂。 (2)实验设计 ①方法:萃取法, 最适宜作萃取剂。 ②实验流程 胡萝卜→粉碎→ →萃取 胡萝卜素←浓缩← (3)鉴定方法: 法。 考点一 DNA和蛋白质技术 [典例引领] 【典例1】 (2014·江苏单科,16)下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述,错误的是 ( ) A.酵母和菜花均可作为提取DNA的材料 B.DNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸馏水 C.向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可见玻棒上有白色絮状物 D.DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝 解析 理论上只要含DNA的生物材料都行,只是从操作难易程度上分,最好选择容易操作的,所以酵母和菜花可作为提取DNA的材料,A正确;DNA在2 mol/L NaCl溶液和蒸馏水中都能溶解,只不
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