抗原的提取与制备课件.pptVIP

处理与粉碎 组织粉碎：机械、生物 细胞破碎：物理、化学、生物 蛋白质分离 选择性沉淀：盐析 有机溶剂沉淀 水溶性非离子型聚合物沉淀 透析技术： 超滤技术： 单一组分提取 层析技术：凝胶过滤 离子交换 亲和层析 离心技术：差速离心 密度梯度离心 电泳技术：电泳洗脱 等电聚焦 凝胶层析（分子筛） 离子交换层析 + + + — — — — — — — + + + + + + + + — — + + + — — + + 亲和层析 * 第一节 免疫学技术的范畴与应用 一、免疫学技术的范畴 二、免疫学技术的应用特点 免疫学技术的范畴 1、对具有免疫活性物质的定性、 定量测定 2、对免疫系统的组成成分的数量、 状态的测定 免疫学技术的应用特点 1、对象——“包罗万象” 2、方法——“兼容并蓄” 第二节 有关免疫学基本概念 一、抗原的概念与属性 二、免疫细胞的概念与分类 三、免疫应答的概念与过程 免疫原性——可识别、可反应性 （诱导机体产生免疫应答的特性） 免疫反应性 ——选择结合性 （和免疫应答产物特异性结合的特性） 抗原的概念与属性 免疫细胞的概念与分类 免疫细胞（Immune cells） 泛指所有参与免疫应答及与免疫应答活动相关的细胞。 免疫活性细胞（Immune competent cell，ICC） 能够接受抗原刺激、产生特异性的活化、增殖、分化并形成效应产物的淋巴细胞。 免疫细胞的类型 红细胞 血小板 肥大细胞 中性粒细胞 巨噬细胞 树突状细胞 浆细胞 T细胞 NK细胞 免疫应答的概念与过程 免疫应答（immune response） 免疫系统接触抗原后，免疫细胞对抗原进行识别；并使特异性淋巴细胞活化、增殖；表现出免疫效应的过程。 免疫应答的阶段 1、抗原识别阶段（antigen-recognizing phase） 2、淋巴细胞活化阶段（lymphocyte-activating phase） 3、抗原清除阶段（antigen-eliminating phase） 第三节 抗原抗体反应的基本原理 一、抗原抗体反应的原理 二、抗原抗体反应的特点 三、影响抗原抗体反应的因素 抗原抗体反应的原理 1、抗原抗体结合的作用力 2、抗原抗体结合物析出原因 引起抗原抗体结合的作用力 1、电荷引力（库仑引力） 2、电子云引力（Van der Waals力） 3、氢键结合力 4、疏水作用力 抗原抗体结合物析出的原因 析出 + — — + + — — + — + + — + — + — + — — + + — — + — + + — + — + — 电解质 + — — + + — — + — + + — + — + — + — — + + — — + — + + — + — + — + — — + + — — + — + + — + — + — + — — + + — — + — + + — + — + — + — — + + — — + — + + — + — + — + — — + + — — + — + + — + — + — 抗原抗体反应的特点 1、特异性 2、可逆性 3、适合比例性 特异性 抗原A 抗原C 抗原B 特异性反应 交叉反应 无反应 可逆性 K（亲和常数）= Ag+Ab Ag Ab 适合比例性 抗体含量 抗原含量 前带 后带 等价带 网格学说（lattice theory） 抗体过剩 抗原过剩 抗体抗体比例合适 抗原抗体反应的影响因素 1、电解质 2、酸碱度（pH值6-8） 3、温度（37-42。C） 第四节 免疫学检测技术的评价 一、评价标准 二、特异性与敏感性的关系 评价标准 Specificity（特异） Sensitivity（敏感） Simpli