现代医学实验仪器与实验技术.doc

基因转导技术（14周） 基因转移技术 将外源基因转移到受体菌或细胞内,在细胞内实现转入基因的扩增或表达的技术。它是重组DNA、基因功能研究、基因治疗的关键技术之一 方式： 转化 感染 转染 转化（Transformation）：将质粒或其它外源DNA导入处于感受态的宿主菌，并使其获得新的表型的过程 感染(Infection): λ噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子，在体外包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，然后才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增 转染(Transfection):是转化和感染两个词构成的新词，指真核细胞主动摄取或被动导入外源DNA片段而获得新的遗传表型的过程。如电穿孔、磷酸钙共沉淀、脂质体等 基因敲除（knock out of gene）：利用基因打靶技术，用无功能的外源基因转入细胞与基因组中同源序列进行同源重组，把具有功能的同源序列置换出来，造成功能基因的缺失或失活，这一技术叫基因敲除 基因敲进（knock in of gene）：利用基因同源重组，将外源有功能的基因转入基因组中不存在或已失活的细胞中与其基因组中同源序列进行同源重组，在细胞内获得表达，这一技术称为基因敲进 统称为基因打靶技术（Gene targeting） 常规转染技术可分为两大类： 瞬时转染：外源DNA/