清热解毒药抗金黄色葡萄球菌黏附乳腺上皮细胞机理的研究.pdfVIP

清热解毒药抗金黄色葡萄球菌黏附乳腺上皮细胞机理研究 摘要 试验通过乳腺基部注射金黄色葡萄球菌悬液感染小鼠乳腺诱发乳腺炎，并用金银花 和／或连翘三种清热解毒药对金黄色葡萄球菌诱发的小鼠乳腺炎进行预防和治疗，同时分 别用EGFP标记E．coliBL21菌株和奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌标准菌株黏附奶牛乳 腺上皮细胞制作细菌黏附细胞模型，共同探讨金黄色葡萄球菌感染乳腺的致病机理，以 及金银花、连翘防治乳腺炎的作用机理、清热解毒药抗金黄色葡萄球菌黏附乳腺上皮细 胞作用机理。 采用组织块接种法结合胰酶消化体外分离培养荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞，当细胞长 满培养孔底80％左右时，用胰酶经过2．3次差时消化培养的原代细胞即得到纯化的乳腺 上皮细胞，对细胞角蛋白18的表达进行检测，鉴定结果显示阳性，即所培养的细胞为 上皮型。且奶牛乳腺上皮细胞在波长为514IlIn光激发下，细胞发出红色荧光。证明乳 腺上皮细胞具有自发荧光的特性。 利用奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌和EGFP标记E．coliBL21感染乳腺上皮细胞， BL21经IPTG诱导