高浓度紫杉醇诱导胞质空泡化样细胞死亡的分子机制的分析.pdfVIP

onthemolecularmechanismof Study high concentrationoftax01．inducedcelldeath l ■ l ● l● J● VaCUOIlZatlon Dy‘：Vt0DlaSmlC - ¨ - By Sun Qingrui Supervisor ． Professor Chen Tongsheng At MOE ofLaserLifeScience KeyLaboratory InsitituteofLaserLife Science， ‘The for CollegeBiophotonics， SouthChinaNormal University June，2010 摘要 高浓度紫杉醇诱导胞质空泡化样细胞死亡的分子机制研究 专业名称：生物物理学 申请者姓名：孙庆瑞 导师姓名：陈同生 摘要 细胞死亡方式有多种类型，包括坏死、凋亡、自噬、有丝分裂灾变、胀亡、 衰老样的细胞死亡和副凋亡等。高浓度紫杉醇诱导的胞质空泡化样细胞死亡是 我们小组最近观察到的一种新的细胞死亡现象，该将其归类于哪种细胞死亡方 式尚无定论，其分子机制几乎完全未知。本论文对高浓度紫杉醇诱导的胞质空 泡化样细胞死亡现象的形态指标、生化指标等特征进行了研究，基于这些特征 探讨了这一死亡现象的分类归属；然后研究了这种死亡方式的分子机制；最后 初步探讨了利用紫杉醇诱导空泡化的机制在体肿瘤治疗的可能性。本研究加深 了人们对这种细胞死亡方式的认识，同时也为将紫杉醇诱导空泡化的机制用于 临床提供理论指导。 本文第一章绪论部分概述了不同细胞死亡方式的主要特征和紫杉醇诱导不 同细胞死亡方式的研究现状，同时说明了本论文的研究目的和意义。 本论文实验部分主要分为三部分： 第一部分：利用共聚焦显微镜、流式细胞仪和WesternBlot等技术研究了高 浓度紫杉醇诱导胞质空泡化样细胞死亡的特征，结果如下：1)高浓度紫杉醇诱 导的胞质空泡化样细胞死亡的没有细胞皱缩反而肿胀，没有凋亡小体形成，没 3 有细胞核断裂，磷脂酰丝氨酸不外翻，对caspase广谱抑制剂不敏感，caspase 不活化等，这些实验结果都表明高浓度紫杉醇诱导的细胞死亡现象不是凋亡；2) 高浓度紫杉醇诱导的细胞死亡中细胞核没有多个微小细胞核的形成也不符合有 丝分裂灾变的特征；3)PI染色显阴性，说明细胞膜完整性没有破坏，不符合坏 摘要 死和胀亡的特征；4)衰老相关p半乳糖苷酶活性检测显阴性，不符合衰老性细 胞死亡的特征；5)然而却符合副凋亡的这些主要特征：衍生于内质网的细胞质 空泡化、线粒体肿胀、没有凋亡小体、没有核断裂、caspase不活化、不被caspase 的抑制剂抑制等。所以我们认为高浓度紫杉