B群链球菌多糖-蛋白质结合疫苗研究和制备.pdf

B群链球菌多糖一蛋白质结合疫苗的研究和制备 摘要 卿攻血症的主鼹致病菌，也是围产期妇女细菌性感染的主要病原体，近年来，在免 疫力低下的成人中也呈上升趋势。奖膜多糖(Capsular 覆与蛋鑫簇载俸共资络会形成戆结合疫莲是预骑GBS感染往痰瘸豹经济有效掇施。 这种疫苗的研制需鼹大量纯化的藻膜多糖抗原，本试验选用分布广、鸯力强 的血清IIIGBS32325作为疫苗制备用的生产菌株。通过摇瓶试验比较不同液体培养 基、生长阁子窥培养方法对GBS生长的影响，抚健了培葬条释，并逐级放大到IOL 6BS生长和焚膜多 和IOOL的擞酵罐中进行深层液体培养，经过多次试验，确立T 糖合成的规棒以及荚膜多糖抗原的收获时间。GBS培养5-6小时，发酵液中的菌浓 度运虱24亿／mL，葵膜多糖含量达弼562ug／mE，为蕊体抗琢收获鹣最佳对蕊。 建立越荚膜多糖抗原分离纯化的工艺条件，用55％、75％乙醇从GBSIII发酵液 中的分级滚淀荚骥多耱，并经过25％的乙醇沉淀去除按酸，冷的苯酚抽提去除杂蛋 自，获得筑纯荚膜多耱抗原。其褥窜为0．0219／L，0．0429／L：分聚系数为0．52， 0．68：残留的蛋白质含嫩和核酸含爨均低于1％。 偶联试栽，将2静纯纯静荚膜多耱撬原分羽与蛋囊质载俸(精制破伤风类繇索) 共价偶联制备成结合疫荫，2种结合物中分配系数≤O．08的结合物收率为20％和 70％。用获褥的结合物及缝化静IIICP8经过皮下注鸯孛免疫小鼠，阉接ELISA法检测 反应远比单独的荚膜多糖强烈。证明破伤风类鸯索作为蛋白质裁体能有效增强荚 壤多糖抗原静免疫原性；剡各I殓IIICPS--TT结合痰靛可鼹于人类GBS感染性疾病的 预防。 ， 关键词： B群链球菌 荚膜多糖 结合痰荫 聋程捧嚣．肄卿同纛 趣盘文公择 and evaluation Preparation of B preclinieal experimental group streptococcal vaccine capsularpolysaecharide—protein conjugate Abstract causeof GBSarethe bacterial and innewborns prime pneumononia meningitis and matemalinfections．In the havedocumented addition，recent peripartum reports as in ofGBSacauseofinfectionadultswithcertain medi