NO在SAP中对胰腺、肺脏的综合作用的研究.pdfVIP

中丈 摘 要 NO在SAP中对胶腺、肺脏的综合作用研究 摘 要 目的:急性重症胰腺炎 ((SAP)是临床上比较常见的急 腹症之一，其发病急，病势迅猛，多系统器官功能不全综合 症 (MODS)发生率高。近年来，一致认为SAP本身就是一 种严重的全身炎症反应综合症 (SIRS)，并逐渐认识到炎症 介质及细胞因子在胰腺炎症发生发展中的决定性作用。NO 作为一种具有自由基性质的细胞因子在 SAP的损害机制中 具有重要作用，但由于细胞因子之间的反应网络错综复杂、 机制繁多，因此对其具体作用机制方面的研究还不够深入全 面。本文通过动物实验，人为诱导大鼠产生SAP，并分别预 先给予NOS底物、NOS抑制剂，从而改变大鼠体内NO的 浓度。旨在观察SAP时NO浓度地升降与大鼠SAP的预后、 转归及胰腺、肺脏损害程度之间的关系。并进而说明NO在 SAP发病机制中的作用途径及其发生机制，从而为其临床治 疗提供理论依据。 方法:13一15周龄雄性SD大鼠48只，体重350-450g, 随机分成4组，每组12只。(1)A组:假手术组 ((SO组) 即急性水肿性胰腺炎组 (AEP)a(2)B组:急性重症胰腺 炎组 ((SAP)口((3)C组:盐酸精氨酸 (L-arg)预治疗组。 (4)D组:硫酸氨基皿(AG)预先治疗组即NO合成酶N(OS) 抑制组。各组动物均于手术前 5分钟腹腔注射 2.5%氯胺酮 0.3ml/100g麻醉。其中A组即假手术组:麻醉成功后手术开 腹，扰动胰腺以造成急性水肿性胰腺炎后关腹，用做对照组; 中丈 摘 要 B组即SAP组:麻醉成功后手术开腹，于胰腺被膜下1.5ml/Kg 剂量注射5%牛磺胆酸钠，诱导急性重症胰腺炎后关腹;C组 即L一arg预治疗组，麻醉前30分钟预先腹腔注射250mg/Kg 左旋盐酸精氨酸，余操作同B组;D组即AG预治疗组，麻 醉成功前30分钟预先腹腔注射15mg/Kg硫酸氨基呱，余操 作同B组。全部动物均于模型制备成功后皮下注射生理薰 10ml/Kg/h，做水电解质平衡支持治疗。每组均于模型制 功后4h,8h,12h分为三批，每批4只，分批处死取材。心 脏采血5ml，随即3000r/min离心分离血清，一80℃低温保存， 以备用ELSA检测血清IL-6浓度;以比色法检测血清NO浓 度;以考马斯亮蓝法检测血清中蛋白浓度。于颈前做大鼠气 管切开，做支气管插管，生理盐水2ml灌洗肺泡支气管后抽 取支气管肺泡灌洗液 (BALF)。如是反复5次，收集抽取液 -80℃保存，以备检测BALF蛋白含量，计算肺通透性指数(肺 通透性指数=血清蛋白浓度//BALF蛋白浓度)。开胸手术切取 右肺下叶滤纸吸干污血渗液，称量组织重量，即肺组织湿重。 80℃恒温烘烤24h，称量肺组织重量即肺干重。计算肺湿干 重比(肺湿干重比二肺湿重/pi卜干重)。手术开胸、开腹切取右 肺中叶肺组织、胰腺组织各约1g左右，生理盐水漂洗干净， 滤纸吸干水分，-60℃保存，以备制备组织匀浆，测量组织中 MPO浓度。 结果:术中发现SAP大鼠腹腔中充满血性渗液，胃肠道 胀气，肠蠕动功能降低，肠麻痹:胰腺水肿，出血样坏死;后 腹膜、大网膜、肠系膜水肿并出现皂化斑;肺脏充血水肿， 点片状出血，肺泡透明膜形成，支气管分泌物增多:血容量 丢失于第三间隙，血液浓缩，血液呈现高凝特性。而对照组 中丈 摘 要 AEP组未出现血容量不足症状，腹腔内仅出现少量淡荧色腹 水;胰腺组织仅出现水肿充血，未出现出血及坏死斑:胃肠 道无明显胀气、渗液，蠕动功能基本正常:肺脏仅出现水肿， 未出现充血等异常病理表现。而NO供体组即L一精氨酸组 和NOS抑制组即氨基肌组大鼠一般情况好于单纯SAP组， 而较AEP组严重。腹腔内出现少量血性腹水，血液轻度浓缩， 血液高凝;胰腺水肿，出现小面积点片状出血坏死斑;胃肠 道胀气、渗液、蠕动状况略好于SAP组而较AEP组严重; 出现轻度肺脏水肿、充血等病理表现，未见点片状出血表现， 支气管分泌物略增加，无肺泡透明膜形成。 NO,IL一6,胰腺组织MPO、肺脏组织MPO、肺通透 性指数、肺湿干重比的各组数据均以均数士标准差表示如 一下: NO:AEP(SO)组:12.45士5