MiR-376a在肝细胞癌发生发展中的作用及机制的研究.pdfVIP

捅要 7 UTR) 7非翻译区(3 个核苷酸的非编码小分子RNA，miRNA主要通过与靶标基因3 的完全或不完全配对，降解靶标基因mRNA或抑制其翻译，从而广泛参与调控个体生 长发育、细胞凋亡、增殖及分化等生命活动。越来越多的证据表明，miRNA的表达紊 乱与肿瘤的发生发展密切相关。肝癌是发病率和致死率都很高的恶性肿瘤之一，5年生 存率不到40％，严重危害人们的生命和健康。因此，揭示肝癌发生发展分子机制的研 究对于有效地预防肝癌，提高肝癌的治疗效果有重要意义。近几年科学家发现了许多 丰富了肝癌发病机制的理论认识。 人和动物的肝脏都具有极强的调节自身生长和大小的能力，肝切除后肝脏即进入 增殖状态，引起一系列肝再生因子水平的变化，比如：肝细胞生长因子(HGFHepatocyte Growth Factor)，这些因子一方面使肝再生精确、有序地进行，另一方面也有可能影响 肿瘤细胞所处的环境，导致肿瘤的复发。因此，肝再生和肝癌之间有着非常密切的联 有许多共有的调节因子，因此我们试想miR-376在肝癌中的表达是否发生异常，而 对象，研究其在肝癌中的作用机制。 目前已经有几篇文章报道了miR．376在人肝内胆管癌，上皮卵巢癌等肿瘤中表达 用及其机制研究未见诸报道。本论文针对miR-376a研究其在肝癌组织中的表达规律并 进一步探讨其功能及分子机制，为更好地阐明肝癌发生发展的分子机制并探索肝癌潜 在的治疗靶点提供实验依据。 一miR-376a在肝癌组织中的表达及其生物学功能的研究 达变化趋势更明显，在大多数癌组织中的表达低于其癌旁组织，说明miR-376a表达水 平的降低是肝癌发生发展过程中的一个高频事件。因此，本文以miR-376a为研究对象 研究其生物学功能以及临床意义。通过对miR-376a在肝癌组织及癌旁组织中的的表达 变化与临床指征进行关联，卡方检验结果提示，miR-376a的表达变化与血清甲胎蛋白的 水平有关，即血清中甲胎蛋白高的患者其癌组织中的miR-376a的表达水平也较高，由 于甲胎蛋白是肝癌诊断的标志物，提示miR-376a可能辅助甲胎蛋白作为肝癌诊断潜在 的标志物。 为了明确miR-376a在肝癌发生中的生物学功能，我们用miR-376amimics处理肝 在裸鼠体内的成瘤率。 二miR-376a下游调控机制的研究 靶基因，得到了大约220个候选靶基因。为了从中筛选到起关键作用的靶基因，我们 进一步用博奥公司的MAS软件对候选靶基因进行了信号通路分析以及GO功能分析， Pathway分析结果显示，候选靶基因相互作用构成了一个复杂的相互作用网络，而 稳定起着关键的作用，并且越来越多的研究表明，microRNA倾向于调控Hub基因。 而qRT-PCR和Westem 中是表达上调的，与miR-376a的表达趋势是相反的，并且我们做了统计分析，两者存 在负相关趋势，说明肝癌组织中p85a的表达上调与miR-376a的表达下调有关。 细胞增殖的作用。这与文献报道的是一致的。另有文献报道，miR-29可以通过靶向抑制 那么p53的表达水平是否变化了呢，我们发现miR-376a 测，miR-376a可通过抑制PIK3R1的表达而激活p53的表达。 三miR-376a上游表达调控机制的研究 2 受表观遗传修饰的调节。为了探讨肝细胞中miR．376a基因簇是否受表观遗传修饰的 另有报道称microRNA与表观遗传修饰相互影响共同参与癌症的发生发展，那么在 达调控。 关键词： miR-3 76a，肝细胞癌，PIK3R1，p53，HDAC9 Abstract MicroRNAs are RNAsof19-25nucleotidesin thatactas endogenous non-coding length tothe3rLJTR be- posttranscripti