Walker256大鼠乳腺癌骨转移性癌痛模型的建立及其伊班膦酸钠作用机制的探讨.pdfVIP

中文摘要 伊班膦酸钠作用机制的探讨 摘 要 目的：乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，乳腺癌易 发生远处转移，而骨骼又是乳腺癌远处转移的常见部位。骨 痛、骨损伤、骨相关事件(SREs)及生活质量降低是乳腺癌骨 转移的常见并发症，严重影响患者的生活质量。 骨癌痛是最严重的一种癌痛，主要源于原发性骨肿瘤或 肺癌、乳腺癌、前列腺癌等继发骨转移，严重影响癌症患者 之前，癌痛研究一直是在非癌症引起的慢性疼痛模型上进行 的。实际上，两者的发病机制并不相同，而在神经病理性疼 痛治疗中有效的药物也不能缓解癌痛。近年来，运用局部注 射方法将不同的肿瘤细胞接种至胫骨骨髓腔内，成功建立了 胫骨癌痛模型，该模型可视为转移性骨癌痛模型，为揭示癌 痛的机制及临床防治提供了有效的研究手段。 目前乳腺癌骨转移的诊断主要依靠X线、CT、ECT等影 像学手段，诊断率低。骨钙素(BGP)是由成骨细胞合成、 释放的一种维生素K依赖蛋白。文献报道，恶性肿瘤骨转移 时血清BGP会发生一定的变化，血清BGP对恶性肿瘤骨转移 的诊断有一定参考价值。 有资料报道，肿瘤所致的骨质破坏活动产生一些细胞因 子(例如ET．1，PGE2)，他们在导致骨溶解的同时，也致敏 周围神经末梢，因而增加了机体对痛觉刺激的敏感性。伊班 中文摘要 膦酸钠属于第三代双膦酸盐类药物，该药可显著减少乳腺癌 骨转移患者的骨相关事件，明显缓解骨痛，改善生活质量。 因此，我们运用Walker256大鼠乳腺癌细胞来制备胫骨 癌痛模型，在该模型的基础上研究疼痛行为学变化，骨质病 理组织学改变；在大鼠胫骨癌痛模型的基础之上，测定血清 BGP水平，探查血清BGP在乳腺癌骨转移中的诊断价值，以 实现乳腺癌骨转移的早期诊断；应用该模型观察伊班膦酸钠 的抗骨癌痛作用，并观察细胞因子内皮素．1(ET．1)、前列 腺素E2(PGE2)在骨癌痛形成过程中及治疗后的变化，从而探 讨骨癌痛的形成以及双膦酸盐发挥作用可能的分子机制，并 且为今后骨癌痛分子靶向药物的研制奠定基础。 方法： 察组、治疗组3组，每组20只。对于观察组、治疗组大鼠 构建大鼠胫骨癌痛模型；对于PBS组大鼠应用微量进样器向 Wistar大鼠左侧胫骨骨髓腔内接种同等体积的无菌PBS溶 液。治疗组大鼠于造模后(postimplantation day,PID)8天开 始，皮下注射伊班膦酸钠4u∥只1／日，连用10天；PBS 组和观察组皮下注射等体积的生理盐水，1／日，连用10天。 分别于PID0，6，8，11，14，17进行一般状况观察，以及大 鼠自由行走痛行为评分和丙酮刺激引发缩足反应时间的测 定；并于PID17应用放射免疫法进行大鼠血清BGP，血浆 软件进行数据处理，各组数据以均数±标准差的形式表示。 中文摘要 结果： 1大鼠一般状况 在整个观察期内，无一例大鼠死亡。各组大鼠造模前后， 在精神状态、进食水、体重方面均无显著差异。体重在观察 期内均缓慢增加。 2大鼠疼痛行为学变化 2．1自由行走痛行为学评分 PBS组在造模后评分有所升高，最高达1分，但于PID 6开始逐渐下降恢复正常：观察组、治疗组大鼠造模后评分 亦升高，但较PBS组升高明显，最高达4分，于PID6与 PIDl7与观察组相比评分显著下降，但仍明显高于PBS组。 2．2缩足反应时间 两组造模动物于PID8缩足反应时间明显下降(P0．01)， 2．3骨组织病理学改变(HE染色) PBS组：骨髓腔内可见各种正常的骨髓细胞，未见骨结 构改变。观察组：骨髓腔内几乎被核大深染的肿瘤细胞所填 充，大部分呈活跃状态，部分肿瘤细胞已坏死，骨小梁稀少。 治疗组：骨髓腔内可见少量生长活跃的肿瘤细胞，大部分肿 瘤细胞已坏死，骨小梁破坏明显。 2．4各组大鼠血清骨钙素(BGP)含量的比较 与PBS组相比，观察组大鼠血清中BGP含量明显升高 中文摘要 O．05)。 2．