三氧化二砷及其顺铂联用抑制乳腺癌裸鼠移植瘤生长作用研究.pdf

中文摘要 三氧化二砷及顺铂联用抑制乳腺癌裸鼠移植瘤生长作 用的研究 摘 要 目的：jjl前，恶性]--J…T曲I 1已经成为威胁人类健康的一大杀 手，严币地影响』，人们的牛活质量、生存健康。因此研究肿 瘤的发病机理、研究开发高效抗肿瘤药物，帮助肿瘤患者早 日摆脱病痛折磨、提高生存质量、延长生命成为肿瘤研究工 作者的当务之急。过去认为肿瘤是由于细胞内癌基因被激 活，导致细胞抉得无限增吼能，JJ；或者是山于细胞在分化发 育过程II·通路受阻，／1：成熟细胞呈克隆性扩增，细胞发育被 阻滞-丁一’定的分化jgj而发乍的。近年来随者对细胞凋亡研究 的深入，JJlI痈4≯家们发现细胞捌广调控的失调也是细胞癌变 的币：婴机制之‘。甚午仃则点认为肿瘤细胞可能起源于本应 该凋广而末发乍I卜常捌f：的细胞。随着研究的深入，人们认 识剑细胞凋产足。种与细J旭坏死有着不同的形态和生化特 征，且受基I大I训控的细胞1i动步E亡的过程。通过诱导细胞凋 亡杀伤肿瘤细胞，不会引起机体强烈的炎症反应，可在杀伤 肿瘤细胞的同时保护机体的正常组织。因此开发研究诱导肿 瘤细胞捌产的约物越米越受剑研究者的关注。三氧化二砷 (Arsenic Trioxide，As二q)足4簟统小．药砒霜中的主要成分， 低剂最的t氧化二砷1lL已拽入我幽11一药史册。近年来其抗肿 痛活性已仃陆续报道，Je对多利l玎十瘤细胞具有抑制增殖，诱 导细J|；f包捌11：或分化的作川。这使得其在抗肿瘤方面具备了良 好的J近川ii景。IIIWM址临床l：常见的抗痛药物，国内外相关 中文摘要 文献认为顺饷有广泛的抗JJq,ji}f作Jfj，可治疗多种晚期癌症， 如：卵巢痛、肺癌等。乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，而 且发病率目前有增高趋势。因而对乳腺癌的预防和治疗等研 究成为肿痛研究领域的一大热点课题。本文以人乳腺癌细胞 系MCF．7裸鼠移植疳f模J怛为训『究对象，探讨三氧化二砷联 合顺钔对抑制人乳腺痛细胞系MCF．7裸鼠移植瘤生长的作 用忭质及Je相瓦f1；川机制。 方法：将MCF．7细胞r 37℃，5％C02等常规条件下传 消化，收集ji：调整为2×10V／ml细胞悬液备用。 1复制人乳腺痈MCF．7裸鼠移植瘤模型：每只裸鼠取1个 注射点，川上述细胞液0．1ml注射于前肢腋下，接种后每天 观察有无肿瘤形成及i率射点有无破溃红肿，按规定时间测量 肿瘤体积大小，以肿瘤直径0．5cm为成瘤。 2病圳学删察：标小(包括心J』J{：、肝脏、肾脏)在10％的福尔： 马林溶液JfJ固定，常舰石蜡包埋后，行HE染色，以评价移 植瘤细胞存光学显微镜下的病珲变化。 3透射电子显微镜观察：从剥离的瘤体上取下一块组织用眼 4℃自d同定，1％饿酸后田定，乙牌系列脱水，最后用Epon812 环氧树脂包蝉，超溥切机L刀』f-，醋酸铀一柠檬酸铅双重染 色，IU镜卜则察ji：照41J。 4流』℃细胞仪(FCM)榆测细胞捌亡、细胞周期分布：从剥 的小块，放昔丁班先预冷的70％乙醇中，4℃固定过夜。将 固定组钐：剪碎，混懋液川300}j铜阚过滤去除细胞团块，收 中文摘要 集细胞悬液，离心，弃l：清，月丁PBS调整细胞浓度为1× 光染色30rain，川流』匕细胞仪行DNA含量分析。 5刚反转录聚合酶链反应(1玎．PCR)检测肿瘤组织中 Survivin 织实验组【和对照组RNA，反转录、扩增后得到的PCR产物 凝胶图像分析系统进行摄像分析。 6 X 胞怂液I 106／ml，按常舰力。法进行荧光标记，用流式细胞仪 检测其荧光强度，以荧光指数(FI)表示蛋白的表达情况。 结果：l皮下接种5灭后明显成瘤，成功建立了裸鼠皮 下移植瘤模型，接种成功率为100％。 2病础学榆食川约纰和埘照纰十日比叫。见肿瘤细胞减少，形态 模糊，核分裂十H少见等，尤以联合川约绀明显。 3经联合川约后，取肿瘤纠【i：}{在透射j乜镜F观察发现：核染 色质呈叫块状，呈典1弘的捌产细胞形态学改变一细胞质浓 缩，核碎裂，染色质浓缩边集。而单药组三氧