乳腺癌阅读框架内噬菌体文库的构建.pdf

摘要 摘 要 目前，癌症依然是当今世界的难题，全世界发病率最高的癌症是肺癌，其次是乳腺 癌，随着生态环境的恶化和生活节奏的加快，癌症在人群中的发病率逐年增高，每年大 约新增100万癌症患者，而早期诊断和早期治疗已经被医学界认为是解决癌症最有效的 方法。肿瘤标志物是反映肿瘤存在和生长的一类物质，通过肿瘤标志物相关参数的变化 可以获得大量的肿瘤生长信息，也为早期癌症诊断提供了依据． 噬菌体表面展示技术在癌症肿瘤标志物的筛选中得到广泛应用，用pKE．2质粒经卡 OI心)内阳性克隆，构建阅读框架内 那抗性筛选富集开放阅读框架(open-reading丘alne 乳腺癌噬菌体表面展示文库可以提高筛选效率。方法：用Trizol试剂提取乳腺癌组织总 I和 HindIII接头，用EcoRI和HindIII消化接头，使形成两端分别带有EcoRI和Hind III粘性末端的双链cDNA，将其连接于带有EcoRI和Hind III末端的pKE-2质粒载体， 连接于带有EcoRI和HindIII粘性末端的T7Select10．3b载体，经体外包装后，以 入片段在O．25．1kb之间。 关键词乳腺癌 开放阅读框架卡那霉素抗性pKE一2质粒载体T7噬菌体展示文库 Abstract Abstract isoneofthe iIlmewodd．TllerateofdiseaSe C锄cer biggestproblems Kghest iIlcidence is isbreaSt and cancermXt ecological l蚰g caIlcer，along埘m oflife’s incidencebeC0mes iIlcreases rhytIlIIl quickening，its lli曲-er，eVe巧yearprobably cancer and isme caIlcer． 1，000，ooO patients．‘Theeadydiagnosenlera【py best、VayagaillSt T1姬10rmarkerscouldrenect也e 10tofiIlf．0锄ation wKch，a presence龇ldgrow出oftumor，by oft啪orc觚beobtained锄dme c纽be earIydiagnosegiSt provided． The obtains in phage·displaylibraIytechnologyme谢despreadapplicationscreelling 衄nor new its illORFsShouldconfer IIlim％avector，pKE-2，bydesig玛cDN缸．c10ned resistaIlceme tllevectoralonearldcDNAiIlserts kanamycin