氡致人支气管上皮细胞线粒体损伤及其RNA表达改变.pdf

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氡致人支气管上皮细胞线粒体损伤及RNA表达改变 中文摘要 中文摘要 目的:流行病学调查和实验研究证实高浓度氡(IU)暴露和肺癌的发生密切 相关。支气管上皮细胞和细胞核DNA是氡及其子体作用的直接靶细胞和重要靶分 子。线粒体在仅粒子辐射旁效应的调节中起重要作用,而线粒体DNA(mtDNA) 是致癌物作用的重要靶点。本课题在建立的线粒体DNA敲除人支气管上皮细胞 (pHBE)模型的基础上,观察氡及其子体照射对pHBE细胞的损伤效应,同时 采用高通量芯片技术,筛选p+HBE与pHBE细胞间以及氡染毒前后差异表达的 机制提供实验依据。 方法:采用溴化乙锭(EB)诱导法构建P’HBE细胞株,并将其置于特制的氡 PCR测 定p-HBE细胞氡染毒前后线粒体拷贝数,活细胞探针标记线粒体DNA数目、线粒 体形态、线粒体膜电位以及细胞内活性氧(ROS)的水平,用AnnexinV和PI染 采用NimbleGen-135K mRNA和miRNA,并用实时荧光定量PCR进行验证。 胞浆内mtDNA的数量显著

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