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载脂蛋白 M 在血糖调控中的应答反应机制及作用 中文摘要 载脂蛋白M 在血糖调控中的应答反应机制及作用 中文摘要 第一部分 实时荧光定量PCR 检测人载脂蛋白M 基因表达的方法 【摘要】目的：建立检测人载脂蛋白 M （Apolipoprotein M, ApoM ）的实时荧光定量 PCR 技术。方法：采用 Primer Express Versions 2.0 设计引物及 TaqMan 探针，检测 ApoM 基因的表达。将扩增的ApoM 基因片段纯化后与 pMD19-T 载体连接，克隆构 建含 ApoM 基因片段的重组质粒，作为定量检测 ApoM 基因表达的标准品。结果： PCR 扩增产物经测序分析证实为 ApoM 特异性片段。本法灵敏度为 40copies/μl，线 1 8 性范围为 4.00×10 ～4.00×10 copies/μl，相关系数为 1.000，扩增效率E 为 90.5%，批 间变异系数为 6.38%～17.9%。结论：成功建立了检测人 ApoM 基因表达的