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- 2016-01-02 发布于湖北
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目的基因的获取.ppt
A 腺嘌呤 G 鸟嘌呤 T 胸腺嘧啶 G 鸟嘌呤 C 胞嘧啶 G 鸟嘌呤 C 胞嘧啶 A 腺嘌呤 T 胸腺嘧啶 1kb =1000碱基对 预变性 退火 延伸 鸟嘌呤 C 胞嘧啶 目的基因的获取 1、什么是目的基因 2、目的基因获取途径 3、PCR法制备方法及过程 一、什么是目的基因 目的基因:是指基因工程操作中需要的外源基因,它是编码某种蛋白质的结构基因, 如生物的抗逆性基因、抗虫基因等。 从目的基因的概念来看, 最原始的目的基因是指从某甲种生物体内直接获得, 然后转入已知的某乙种生物体内并让其成功表达以使乙种生物能表现甲种生物的某种特征的基因。 需要克隆的DNA片段 编码某种蛋白质 研究某基因结构和功能的关系 研究某基因与疾病的关系 二、目的基因的获取 化学合成法 基因组DNA文库;cDNA文库 聚合酶链式反应 直接从染色体DNA中分离 三、PCR扩增获得目的基因 1、PCR的含义 聚合酶链式反应 Polymease Chain Reaction(PCR) 是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。 PCR 可以把 指定的基因片段 几何放大 染色体 PC
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