四高效液相色谱常见故障分析和排除方法.ppt

第四讲.常见故障分析和排除方法 天津市倍思乐色谱技术开发中心 压力问题 流量问题 基线问题 峰型问题 压力问题 1.输液不稳 压力波动较大 2.无压力 3.压力波动 4.柱压太高 1.输液不稳 压力波动较大 泵头内有气泡 原溶液仍留在泵腔内 气泡存于溶液过滤头的管路中 单向阀不正常 柱塞杆或密封圈漏液 管路漏液 2.无压力 两泵头均有气泡 进行阀泄漏 泵链接管路漏 3.压力波动 其中一个泵头内聚集了气泡 泵中两溶剂不能互溶 高压系统中有泄漏（入口隔膜，进行阀，入口固件） 泵的单向阀已脏 4.柱压太高 柱头被杂质堵塞 柱前过滤器阻塞 在线过滤器阻塞 流量问题 1.泵运行，但无溶剂输出 2.实际流速低于设定值 3.流量不稳 4.泵流速变小 1.泵运行，但无溶剂输出 泵腔内有气泡 气泡从输液入口进入泵头 泵头中有空气 单向阀方向颠倒 单向阀阀球座粘连或损坏 溶剂储液瓶已空 2.实际流速低于设定值 单向阀不正差 过滤头有污物 3.流量不稳 泵头内聚集气泡 泵内溶剂分层 泵头松动 输液管路漏液或部分阻塞 4.泵流速变小 泵内气泡聚集 溶剂过滤器阻塞 泵中两溶液不互溶 柱塞密封泄漏 压缩补偿调节失灵 基线问题 1.基线噪声 2.基线漂移 3.随着泵的往复出现尖刺 1.基线噪声 检测池窗口污染 样品池中有气泡 检测器或数据采集系统接地不良 检测器光源故障 液体泄漏 很小的气泡通过检测池 有微粒通过检测池 2.基线漂移 检测池窗口污染 色谱柱污染或固定相流失 检测器温度变化 检测器光源故障 原先的流动相没有完全除去 溶剂储存瓶污染 强吸附组分未从色谱中洗脱 3.随着泵的往复出现尖刺 检测池中有气泡 峰型问题 1.进样后不出峰 2.进样不出峰或者逢高不正常 3.出现无名峰 4.峰形拖尾 5.平顶峰 6.出负峰 7.有空峰（假峰） 8.色谱峰未分开 9.分离度变差 10.保留时间不重复 11.峰重现性差 12.峰裂分 13.峰展宽 1.进样后不出峰 检测方式选择不当导致样品无吸收 试样溶液浓度太低，而检测灵敏度不高 检测器到记录仪之间的输入信号线连接不好或断开 记录仪的信号线接错 进样用注射器阻塞或泄漏，使样品溶液不能进入进样阀 2.进样不出峰或者逢高不正常 注射器泄漏 阀转子上针头密封垫磨损导致泄漏 选用的注射器枕头与阀不匹配 定子与转子接触密封面损坏引起内通道断路 定体积量管阻塞 3.出现无名峰 转子针头密封密封垫及进样针导致导管污染 阀样品通路清洗不干净 4.峰形拖尾 定体积量管与阀链接出现死区 进样器内有污染或不干净 色谱柱选择不当，试样与固定相间有作用 进样技术差 样品在流动相中溶解度小 进样量太大 色谱柱与阀的链接管连接处出现死区 5.平顶峰 色谱柱超载 记录仪灵敏度过高 记录仪机械部分有故障 记录仪接收到信号超过了测量范围 检测池及其透镜、池窗等光学附件污染 6.出负峰 记录仪或检测器极性接反 用示差折光检测器检测时，样品的折射率小于流动相溶剂的折射率 使用的流动相不纯净 样品池与参比池接反 进行故障 光电池与放大器接错 用UV检测器时，溶解用品所用的溶剂与流动相容剂不能互溶或两溶剂PH不同 7.有空峰（假峰） 不同批号不同处理条件的溶剂分别用来溶样或作为流动相时，易出空峰 流动相溶剂中有杂质或气泡，用该流动相配样，自然会出空峰 样品中未知物 柱未平衡（尤其是离子对色谱） 进样阀残余峰 样品溶剂洗脱（与流动相的组成不同） 用不同批号的溶剂溶解样品 8.色谱峰未分开 色谱柱分离度低，柱效不高 色谱柱或色谱条件（溶剂、检测器、温度、流速、柱子等）现在不当 柱子过载 流动相流速过大 柱中填料流失过多，增加了柱外效应 进行技术不佳 9.分离度变差 柱端固定相板结 柱端床层塌陷 柱子寿命已到 进样量过大 样品浓度过大 试样溶解不完全 试样黏度大 色谱柱污染，柱效下降 10.保留时间不重复 更换流动相时，旧流动相未完全被顶替掉 正相柱中流动相脱水不完全 柱温变化 缓冲溶液容量不够 柱内条件变化 柱塌陷或形成短路通道 11.峰重现性差 注射器针头太长，样品液部分漏掉 进样技术欠佳，表现为峰面积忽大忽小 管路有漏处 仪器没有充分稳定 实验条件发生变化 注射器有泄漏或单赌塞现象 进样速度不一致 进样阀开关不灵，阀门没有充分打开 样品溶解度小，进样后又少量在流动相中析出 流动相流速发生改变 12.峰裂分 样品中可能有异构体 样品不稳定，有部分分解 进样量达，柱超载 柱子中有孔隙 13.峰展宽 进样体积过大 柱外体积过大 流动相黏度过高 保留时间过长 样品过载 * * BaseLine ?