超氧化物歧化酶在缺血预处理保护大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用.pdfVIP

中文摘要 (前 缺血再灌注损伤普遍见于各内脏器官，肝脏是容易遭受缺血 再灌注损伤的脏器之一，如何减轻肝脏缺血再灌注损伤是肝脏外 科、肝移植术的研究热点。肝脏缺血再灌注损伤的确切机制还未阐 明，已有的研究提示可能与氧自由基的大量生成、钙超载、肝微循 环受损及高能磷酸化物合成减少有关。其中氧自由基在肝脏缺血 在实验中发现缺血预处理(Ischemic 轻肝脏热缺血再灌注损伤后，围绕IP的机制展开一系列研究。本 实验应用大鼠部分肝叶热缺血再灌注模型探讨超氧化物歧化酶 (SOD)在缺血预处理保护肝脏缺血再灌注损伤中的作用。 材料与方法 取雄性Wistar大鼠，体重250一300克，术前禁食12小时，自 由进水，10％乌拉坦按lml／1009腹腔注射麻醉。上腹正中切口， 充分暴露肝脏，游离肝左外侧叶周围韧带，使其只以出入肝之血管 蒂与机体相连，无损伤血管夹央闭该血管蒂为缺血，去夹恢复血流 为再灌注。取三组大鼠，每组10只。对照组(C组)：麻醉，开腹后， 仅分离肝左外侧叶周围韧带；缺血再灌注组(I／R组)：肝左外侧叶 缺血40分钟，再灌注90分钟；缺血预处理组(IP组)：肝左外侧叶 缺血10分钟，再灌注10分钟，继以40分钟缺血，90分钟再灌注。 实验结束，主动脉采血，室温静置30分钟，2500转／分离心10分 钟，取血清零下20摄氏度冰箱保存，冰冻血清以日立全自动生化 分析仪检测丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸转氨酶(AST)及乳酸 脱氢酶(LDH)。以镊子分别取小块左外侧叶、右叶(C组仅取左外 ·】。 侧时)群组织：(1)、零下20摄氏疫冰箱保存，黄瞟呤氧化簿法溺肝 组织超裁化物歧化酶(SoD)含量(试剂盒购自南京建成生物工程 研究所)；(2)、10％福尔马林霭定，常规石蜡包鬈仞片，HE染色， 光镜下观察肝脏病理形态学改变。另取7只大鼠，仅行IP处理 (oIP缓)：秆盔矫铡吁缺蛊10分钟，再灌注lO分锌后，分剃取拜于 左外侧叶、右叶组织测SOD含量。数据以X士S表示，组闻比较采 糟Student’St检验。 绦 莱 血清酶学指标：ALT，I／R组显著高予C组(355．667±118。 versus 020U／L 41．167士19．000 U／L，t一4．03，PO．01)，IP组 (197。333士160．712 U／L)与上述筒组比较差异均不显著(t=2． versus 167．644 89．333士20。646 U／L U／L，t=9．31，P0。01)， {P组(415．500士184。340 U／L)虽然也显著高子C缰(t一4．31，P versus U／L 163．833±83． 最著高于e缱(1925。5004-438．670 850 U／L)虽 4．92，p0．01)。病理形态学改变：C组，肝组织结构清楚，小叶中 必静脉，j汗细稳索，器寞，汇管区结构清晰，肝缨稳索瓣剜正常，肝 细胞无明显变性，窦内皮清楚；I／R组，肝组织结构不清，肝细胞 索，翳赛分界誉清，肝绷蒡篷多数施浆巯松纯，气球样变褴，溶解坏 死，网状纤维支架有塌陷；IP组，肝细胞损伤较I／R组轻，肝细胞 浊肿，永样变径，部分j扦细箍坏死，群缏施绪构尚清。可觅I／R缀 明显受损，IP组损伤明显轻于I／R组，接近c组水平。肝组织 I／R组(左外侧叶，164．025±30．075 NU／mg蛋白；右叶，183．675 ·2‘ ±20．025 NU／mg蛋白；右叶，176．