轻度热应激大鼠脾脏巨噬细胞免疫功能分析.pdf

摘要 摘要 轻度热应激大鼠脾脏巨噬细胞免疫功能的研究 第一部分大鼠脾脏巨噬细胞的分离与培养 目的：分离培养并鉴定大鼠脾脏巨噬细胞。 方法：SD大鼠，腹腔注射水合氯醛麻醉，无菌取脾脏，制备成脾脏组织细 胞混悬液，裂解脾脏组织细胞混悬液中的红细胞；用RPIM-1640培养基重悬沉 1、2、3、6、12、24h，洗涤未贴壁细胞，相差显微镜下分别观察脾脏巨噬细胞 的贴壁情况，确定最佳细胞贴壁时间。应用免疫组织化学等方法进行细胞的鉴 定；台盼蓝染色鉴定细胞活力，瑞氏染色鉴定细胞纯度。 结果：1．大鼠脾脏组织经过研磨等处理后，得到大量的脾细胞混悬液，可以 满足进一步的分离培养的需要：2．观察贴壁细胞， 1-3h细胞少量贴壁，12h 3． 左右的贴壁细胞增多， 24h的贴壁细胞减少。12h是贴壁细胞合适时间； 相差显微镜下观察到贴壁培养的脾脏巨噬细胞多为圆形或椭圆形，少数呈梭形 或多边形。镜下观察细胞体积较大，细胞膜完整，细胞核清晰可