强化融合蛋白Fv-LDP-AE体外活性的分析及其产生融合蛋白Fv-LDP的重组菌E.coli+BL21（DE3）Star-%27TM-%2fpEFL高密度发酵.pdf

中国协和医科大学博士论文 中文摘要 中文摘要 抗体的人源化、高效化、小型化以及新的分子靶点的开发是当今抗体药物的 的主要研究趋向。单抗导向药物借助抗体部分与靶抗原部分的特异性结合，将某 些生物活性物质导向肿瘤靶部位而发挥抗瘤效应。Ⅳ型胶原酶高表达于人体多种 实体瘤组织，是一个值得研究分子靶点。LDM属于烯二炔类抗生素，具有强烈 的杀伤癌细胞和独特的DNA切割活性。LDM由烯二炔发色团和辅基蛋白两部 分构成，二者可拆分和重建。LDM目前已完成I期临床研究。Fv—LDP是运用基 因工程技术构建的抗Ⅳ型胶原酶单链抗体scFv与LDM辅基蛋白LDP形成的融 合蛋白。融合蛋白Fv—LDP可通过分子强化手段与LDM活性型发色团AE结合 靶向性和特异结合性，又具有LDM强烈细胞毒作用。本研究主要包括两部分： BL21(DE3)Star“佃EFL的高密度发酵。 一强化融合蛋白Fv．LDP．AE抗肿瘤活性研究 DNA切割实验表明，通过分子强化获得的强化融合蛋白Fv．LDP．AE具有剂 些结果表明，强化融合蛋白Fv—LDP—AE承袭了LDM直接切割DNA的能力。 我们还观察了强