变性剂诱导的牛碳酸酐酶B的去折叠和重折叠过程以及其集聚作用研究.pdfVIP

变性剂诱导的牛碳酸酐酶B的去折叠和重折叠过程以及集聚作用 的研究 中文摘要 本文应用内源荧光光谱、荧光相图、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、高效凝胶排阻色 谱、激光光散射光谱以及十二烷基硫酸钠．聚丙烯酰胺凝胶电泳研究了脲和盐酸胍诱导 的牛碳酸酐酶B的去折叠和重折叠过程。 在脲和盐酸胍诱导的牛碳酸酐酶B的去折叠过程中，溶液始终保持澄清，没有牛碳 酸酐酶B集聚体沉淀产生。内源荧光光谱和荧光相图表明，脲和盐酸胍诱导牛碳酸酐酶 B的去折叠过程中分别存在一个和两个中间态；PAGE、高效凝胶排阻色谱和激光光散 射光谱分析结果表明，在脲和盐酸胍诱导牛碳酸酐酶B的去折叠过程中，牛碳酸酐酶B 在变性液中没有多分子集聚体产生；同时，SDS．PAGE分析结果表明牛碳酸酐酶B二分 子集聚体是由单分子牛碳酸酐酶B通过静电和疏水相互作用形成的。 在脲和盐酸胍诱导牛碳酸酐酶B的重折叠过程中，当脲和盐酸胍浓度分别大于1．0 mol／L mol／L和O．7mol／L时，溶液始终保持澄清，当脲和盐酸胍浓度分