蛋白质质谱分析进展与应用.pptVIP

蛋白质分析方法进展与应用  第十一组 * 内容 前言 分析法概述 电泳技术 质谱技术及应用 * 前言 蛋白质是生物体中含量最高，功能最重要的生物大分子，作为生命的物质基础之一，蛋白质在催化生命体内各种反应进行、调节代谢、抵御外来物质入侵及控制遗传信息等方面都起着至关重要的作用，因此蛋白质也是生命科学中极为重要的研究对象。随着生命科学的发展，仪器分析手段的更新，尤其是质谱分析技术的不断成熟，使这一领域的研究发展迅速。 * 浊度法和凯氏定氮法 吸光光度法 紫外光谱吸收法 双缩脲法 劳里法 4-喹啉甲酸法（BCA） 染料探针法 染料-金属配合物探针法 共振瑞利散射法 分析法概述 蛋白质表面形成一个有机染料的覆盖层，这种以蛋白质为支撑核心的大的染料聚集体远大于染料自身聚集体的体积，因此两者结合后，光散射的强度急剧增加，并与加入的蛋白质浓度成正比。共振散射强度通常较单一的瑞利散射提高几个数量级 * 荧光光度法 内源荧光法 外源荧光法 有机荧光探针 稀土荧光探针 荧光偏振 时间分辨荧光光谱法 激光诱导时间分辨免疫分析法 高效液相色谱法 电泳法 分析法概述 * 电泳技术 等电聚焦电泳 固相pH梯度等电聚焦（ IPGIEF） 凝胶电泳 SDS尿素聚丙烯酰胺 用于低离子强度 下不溶的膜蛋白 非变性凝胶电泳 可区分仅有一个电荷单 位差别的分子，降低蛋 白质变性机率，可直接测酶