人参皂甙Rg3不同构型免疫佐剂作用和抗氧化作用及机理研究.pdfVIP

人参皂甙R93不同构型免疫佐剂作用和抗氧化作用 及其机理的研究 ㈣瞅 摘要 ginsengC．A．Meyer)中分离提取出来的天然化合物。由于其对肿瘤细胞有很强的抑制 作用，所以在人医临床被广泛用于治疗各种肿瘤疾病。R93在自然界中存在20．c键的 免疫活性研究中存在显著差异。因此，本论文通过研究R93两种异构体的免疫佐剂作用、 抗氧化作用和对巨噬细胞功能的调节作用，研究R93两种异构体的免疫学特性，并比较 两者间免疫活性的差异。 1 R。93不同构型免疫佐剂作用的研究 目的：采用OVA作为模式抗原，探讨R93两种不同构型的免疫佐剂作用和对小鼠 免疫后，间隔3周再免疫第二次。分别采集一免和二免后第14天小鼠血液，并检测血 清IgM抗体水平、IgG及其亚类抗体水平。二免后第14天，所有供试小鼠处死并分离 培养脾脏淋巴细胞，RT-PCR法检测OVA抗原刺激后脾淋巴细胞中相关细胞因子的表达； 2 R．93不同构型抗氧化作用的研究 目的：用环磷酰胺(CyclophosphamideCy)建立小鼠免疫抑制模型，在此基础上应用 数、脾脏指数、酸性磷酸酶(AcidPhosphatase Dismutase Oxide LZM)、总抗氧化能力 SOD)、一氧化氮(NitricNO)、溶菌酶(Lysozyme Antioxidant Oxidase XOD)、过氧化氢酶 (Total CapacityT-AOC)、黄嘌呤氧化酶(Xanthine (Catalase CAT)和丙二醛(MalondialdehydeMDA)等免疫学和抗氧化指标的影响，探讨 均可提高由Cy诱导的免疫抑制导致降低的小鼠胸腺指数、脾脏指数、ACP活性、SOD 显的抗氧化作用，20(R)一R93抗氧化活性优于其异构体20(s)一R93。 3 a93不同构型对巨噬细胞功能调节作用的研究 factor B 的影响及诱导鼠源巨噬细胞的细胞因子(IL一10和TNF．0【)和Nuclear kappa DHR)处理后，与粉红色荧光乳胶微球共同培养， 用二氢诺丹明(Dihydrorhodaminel23 由于细胞的呼吸爆发作用可引起细胞内本身不发光的DHR转化为发绿色荧光的诺丹明 (RhodamineROD)，用流式细胞仪和激光其聚焦显微镜同时测定粉红色荧光(代表细 胞吞噬或粘附粉红色荧光微球的数量)和绿色荧光(间接反应了细胞呼吸爆发的力度)， 二以Raw-blue necrosis IL．10的分泌随浓度的刁‘断增大而降低。与20(S)．R93相比，20(R)-R93能显著刺激细 Il 爆发作用和吞噬作用清除机体内的活性氧自由基，发挥抗氧化作用，但20(s)．I沁3抑制 细胞呼吸爆发作用和吞噬作用的机制有待进一步研究。 综上所述，20(R)一R93的免疫佐剂作用、抗氧化能力和巨噬细胞调节作用都优于 20(s)．R93，是一种理想的免疫调节剂。 III STEREOSPECIFICADJUVANT OF EFFECTANDMECHANISM 1NMICE RG3 OF