栽培稻抗旱性状评价和定位及育种应用.pdf

捅 要 干旱是世界农业生产的主要障碍之一，水稻是世界上主要耗水作物，水稻抗旱 性的研究对粮食增产增收具有重要意义。建立科学有效的抗旱性评定方法和鉴定体 系，定位与克隆水稻抗旱性相关的基因，利用分子标记辅助选择和转基因技术，结 合常规育种，进行节水抗旱、优质高产多抗等性状的聚合，培育节水抗旱新品种是 水稻抗旱性研究的主要内容。本研究对可能的抗旱鉴定指标穗颈粗和穗水势进行了 分析，利用抗旱群体材料对抗旱性状进行分子标记定位，并通过标记辅助选择技术 构建了4个抗旱目标区段的近等基因系，精细定位了部分相关主效QTL，通过候选 基因法克隆了其中一个可能的抗旱相关基因OsGRAS，并将来源于第4染色体的目 标区段导入到旱稻保持系中，获得了稳定株系。主要结果如下： 1．穗水势：调查生育后期进行干旱处理的3个品种(2个早稻和1个水稻)在 晴天每隔1-1．5h一天内穗水势和叶水势的变化，发现旱稻品种的穗水势和叶水势比 水稻品种开始下降要慢，比水稻品种保持更高的水平且恢复更快。在晴天中罕j穗 水势和叶水势在早稻和水稻间的差异甚至在正常水分条件下也能观察到。穗水势和 叶水势与关乎植株生长和植株产量组成因子的7个性状存在相似的相关性。基于穗 水势和叶水势日变化的的平行趋势及两者间的高度相关，提出穗水势可以作为植株 水分状况的一个指标，穗水势能更有效区分不同早稻品种的抗旱性差异。 同水分处理下的穗颈粗，发现穗颈粗与很多农艺性状，尤其是穗型极显著相关。通 径分析表明两种水分条件下穗颈粗主要是通过颖花数或实粒数来对产量产生影响。 基于213个SSR标记构建的连锁图谱，总共检测到3个控制穗颈粗的主效QTL，其 枝梗数、二次枝梗数、每穗颖花数、着粒密度和每穗实粒数。共检测到17个与穗颈 粗有关的上位性QTL，贡献率变异为2．58％．5．64％。 通过杂交和连续回交，利用分子标记辅助选择技术对前景进行筛选，将IRATl09 的第4染色体区段导入到旱稻不育系沪旱1A的保持系沪旱1B中，抗旱性鉴定发现， 导入的材料在实粒数、穗颈粗和产量上有显著提高。 3．近等基因系构建与OsGRAS基因克隆：立足于两年定位结果中5个控制较多 抗旱相关性状的QTL区段，通过杂交和回交，并利用分子标记对前景和背景进行选 择，构建目标区段来源于早稻IRATl09而其余背景均为水稻珍汕97B的近等基因系。 对其中4个区段的近等基因系进行了抗旱性鉴定，在干旱条件下导入有QTL区段的 的范围内。第7染色体上影响实粒数和结实率的QTL定位在83kb的区间内，而控 制颖花数和实粒数的则定位在446kb范围内。对精细定位的区段内的候选基因进行 了初步的分析。并根据候选基因eDNA序列，设计引物，扩增获得OsGRAS的编码 族的一个成员，其具有该家族典型的结构域。通过酶切及载体连接，共构建了 份G：剃S基因及其启动子相关的三个表达载体。 关键词：耐旱性；穗水势；穗颈粗；近等基因系；数量性状位点；分子标记辅 助选择育种；基因克隆；水稻 Ⅱ Abstract isoneofthemostseriousworld—wide in isthe Drought agriculture，rice problems waterconsumerin of tolerantvarietiesis largest crops．Developmentdrought largely the and of in basedon quickprecisescreening and materials germplasmbreeding water-limited and the