湿热证慢性乙型肝炎T7噬菌体cDNA文库的建立.pdfVIP

广州中医药大学学报 2014年7月第31卷第4期 626 JournalofGuangzhouUniversity ofTraditionalChineseMedicine July 2014，Vo1．31，No．4 湿热证慢性乙型肝炎T7噬菌体 cDNA文库的建立 孙砚辉， 张广献， 邝枣园， 宋梦微， 张韧 f广州中医药大学基础医学院，广东广州 510006) 摘要：【目的】利用q7噬菌体展示技术建立湿热证 乙型肝炎患者肝组织的cDNA噬茵体文库 ，为淘选治疗湿热证慢性乙型肝 炎中草药的作用靶标等工作奠定基础。 【方法】选择2例中医诊断为肝胆湿热证的慢性乙型肝炎性肝癌患者，肝移植术后分 别取其手术摘除肝脏的癌旁组织．采用RNAisoPIus试剂提取总RNA，用含有 dC10T30寡核苷酸的聚腺苷酸序列亲和试剂 OligotexSuspension纯化 mRNA．逆转录合成双链 cDNA后 ，加上Hindm和EcoRI接头，并与酶切后的T7Select10—3b载体 连接，体外包装并扩增得到湿热证慢性乙型肝炎T7噬菌体cD