乳中主要共轭亚油酸异构体分析.pdf

摘要 摘要 linoleic acid，CLA)是一类含共轭双键亚油酸的位 共轭亚油酸(conjugated 异构体的总称，是反刍动物乳、肉中存在的天然脂肪酸。CLA具有多种有益的 lt-CLA 生理活性。研究证实了不同的CLA有不同的生理活性，已经公认的如9c，1 具有抗癌活性，抗粥样动脉硬化，免疫调节的功能；10t，12c．CLA可抑制脂肪的 合成，具有减肥的作用。因而建立可靠的分析方法确定食品中共轭亚油酸异构 体组成，分析CLA异构体的种类，对于研究CLA结构与生理活性的关系以及 共扼亚油酸在食品中的应用，都有着十分重要的意义。乳脂肪是丰富的天然CLA 的来源，全乳平均lg脂肪含CLA约有10 mg，牛奶中CLA的主要异构体是生 lt-CLA，约占90％。为分析不同乳中CLA的准确含量和类型， 理活性很强的9厶1 了解各种因素对乳及乳制品中CLA含量的影响，建立快速准确的分析方法是非 常必要的。 本研究采用银离子高效液相色谱法(A矿．HPLC)法和胶束电动色谱法 (MEKC)对几种奶样中主要的CLA异构体的含量进行了分析测定，研究中对 乳脂的提取，样品的处理方法以及仪器分析条件进行了优化，较好地提高了分 析水平，主要结果如下： 1．对不同的乳脂提取方法进行比较。结果表明，在提取试剂为正己烷：异 丙醇=l：l(v／V)时，采用超声波辅助提取乳脂，提取乳脂的效果最佳。 2．比较不同的甲酯化方法对对乳脂中CLA的酯化效果的影响，确定 NaOCH3．CH30H进行酯化的效果较好，甲酯化较完全，并以响应面法对其进行 优化，其最优条件为NaOCH3．CH30H添加量为8．56mL，反应温度为24．4℃， min。 反应时间为12．8 3． 采用一根银离子柱的A矿．HPLC对CLA异构体进行分离，可实现对两 1 种生理活性较强的CLA异构体9G 7．812--一500 It．CLA的进样量呈现良 lxg／mL范围内，HPLC分析的峰面积与9c，1 lt-CLA进行定量分析。 好的线性关系，可用于对样品中的9c，l 4． kV，柱温20℃，进样时间 优化了MEKC的分离条件：分离电压25 摘要 s)，MEKC 10s。在优化的条件下(分离电压25kV，柱温20℃，进样时间10 巴氏奶、超高温瞬时灭菌奶(UHT)中CLA含量及组成进行分析，CLA总含量 (9c，1lt-CLA与10t,12c．CLA含量的总和)：鲜奶为9．281 mg／g乳脂、巴氏奶为 9．129 l mg／g乳脂、UHT为8．63mg／g乳脂，各奶样间9厶1 含量的总和)分别为9．220 mg／g乳脂、2．972mg／g乳脂、6．054mg／g乳脂，各奶 样间9厶11f-CLA与10t，12c．CLA比例差异显著。 5．采用Ag+-HPLC对不同处理和条件的奶样进行分析，发现热处理(巴氏 杀菌、超高温瞬时灭菌)对奶中9c，llt-CLA的含量均有影响，超高温瞬时灭菌 lt-CLA含量， 可降低CLA的含量，影响最大；保存时间也可影响奶中的9c，l