BM SCs在骨关节外科领域中的研究进展.pdfVIP

东 大学 ‘医学版 JS南 学报 di 2。l4，Oct；33 outheastUniv MedSciEd、 ‘’’ 、(5)：6…‘6卜6…65 Sout Univ (Med E · 661 · · 综 述 · BMSCs在骨关节外科领域 中的研究进展 孙鹏浩，王宸，常青 (东南大学附属中大医院，江苏 南京 210009) [摘要]骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemceils，BMSCs)是骨髓中除了造血干细胞之外的另 一 种干细胞，在特定的诱导因素诱导下BMSCs能够向成骨细胞、脂肪细胞、肌细胞、神经细胞等细胞分化，同 时其可在体外培养条件下进行增殖、诱导和分化。目前，BMSCs在组织工程、细胞治疗等相关领域有着广泛 的应用前景。 [关键词]骨关节；骨髓间充质干细胞；分化潜能；生长因子；组织工程；文献综述 [中图分类号]Q813 [文献标识码]A [文章编号]1671—6264(2014)05—0661-05 doi：10．3969／j．issn．1671-6264．2014．05．028 骨髓问充质干细胞 (bonemaITowmesenehymM— 低_2—；(3)细胞表面分子标记分选法：利用BMSCs的 stemcells，BMSCs)是干细胞的一种，存在于骨髓中，它 细胞表面标记物进行分离，这种方法一般利用流式细 的存在是 1976年 由Friedenstein等…首次提出的。因 胞仪、免疫磁珠或者免疫沉积法。尽管通过此方法获 为其在体外培养过程中容易贴壁并形成纤维样的克 得的细胞纯度很高，但由于如今研究仍未找到特异性 隆，因此也被称为成纤维细胞集落形成单位。多数的 的BMSCs表面标记物。而且该方法步骤较多、过程长、 BMSCs在体内处于休眠状态，只有当受到一定刺激因 成本较高、分选效率低，且对细胞活性有明显影响，故 素作用时才进入细胞周期，增殖并分化成骨或软骨组 较少采用 J。 织等之类的细胞集落。 2 BMSCs的生物学特性 1 BMSCs的分离培养 2．1 形态学特征 目前，体外分离培养 BMSCs较为常用的方法有： BMSCs体外培养时细胞形态主要表现为梭形、纺 (1)全骨髓培养法：因BMSCs体外培养时有贴壁生长 锤形，少数 BMSCs为多角形。由于 BMSCs细胞贴壁 的特性，故在无菌获得的骨髓中加入培养基制成细胞 生长的特性，体外培养时其可以贴附于培养皿或培养 悬液，将细胞悬液直接置于培养瓶中培养，原代培养时 瓶表面，并形成集落或融合层。原代细胞接种后约 1d 培养物中造血细胞 占大多数。该方法的优点在于操作 就可见细胞贴壁生长，刚贴壁的细胞多为单个，形态多 简单、细胞活性好，但所得细胞的杂质细胞较多，纯度 为圆形，首次换液后 5—7d可见集落形成，细胞形态 不高 ；(2)离心培养法：利用骨髓中各种细胞比重 呈长梭形、三角形或星形。原代细胞通常培养 10d左 的不同，使用梯度离心法分离并提取 BMSCsS后进行 右，可见细胞增殖迅速 ，两周后每个小集落即可形成由 培养。在骨髓中加人淋巴细胞分离液稀释混匀后，以 数百至上千个细胞组成的大集落。 1500～2000r·min 的速度离心20～30min，取交界 2．2 增殖扩增能力 处的单核细胞层，再用PBS冲洗 2～3次，加入培养基 由于骨髓中BMSCs的含量非常少，且数 目随着供 中接种培养即可。这种方法优点为所获得细胞纯度较 体年龄的增长或身体情况的衰弱数量会逐渐减少，