Detection of Bluetongue Virus Group-specific Antigen Using Monoclonal Antibody Based Sandwich ELISA.pdfVIP

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2016-01-14 发布于河南
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Detection of Bluetongue Virus Group-specific Antigen Using Monoclonal Antibody Based Sandwich ELISA.pdf

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VIROLOGICASINICA，December2010，25(6)：390—400 DOI10．1007／s12250．olo一3160-Y ◎WuhanInstituteofVirology．CASandSpringer-VerlagBerlinHeidelberg2010 DetectionofBluetongueVirusGroup—specificAntigenUsingM onoclonal AntibodyBasedSandwichELISA PradeepNarayanGandhale，VeerakyathappaBhanuprakash ”VinayagamurthyBalamurugan ， MadhusudhanHosamani。， GnanavelVenkatesanandRajKumarSingh fjD．ivisionofHrology,IndianVeterinaryResearchInstitute,Mukteswar263138,Nainital(Distt．)．Uttarakhand, India；2．Pr0jectDirectorateonAnimalDiseaseMonitoringAndSurveillance560024；3．Indian Veterinary ResearchInstitute,CampusBangalore560024,4．NationalResearchCentreonEquines，Hisar125001，Haryana) Abstract：Amonoclonalantibody(MAb)specificforthebluetonguevirus(BTV)groupspecificantigen(VP7) wascharacterizedofritsreactivitywithpurifiedvirusandrecombinantBTV VP7(rVP7、proteinandits suitabilityforuseinthesandwichELISA．TheMAb．designatedas5B5wasspecifictoVP7andbelongsto IgG2asubclassandwasselectedforthedevelopmentofthesELISA inthisstudy．TheMAbhadatiterof1：25 withBTV and 1：2withthervp7protein．ThesELISA isbasedoncapturingofBTV antigenwithVP7specific MAbfollowedbydetectionusingBTV polyclonalantiserum raisedinrabbits．Theassaywasevaluatedwithsix cellcultureadaptedserotypesofBTV thathavebeenisolatedfrom India，1，2，15，17，18and23．Th eassaycould detectBTV antigenasearlyasday8inblood．ItwasalsosuccessfullyappliedofrthedetectionofBTV group specificantigeninclinicalsamplesofblood，washedRBCs，buffycoatandplasma．A totalof102fieldsamples rfom animals，suspectedofbeinginfectedwithBTV，weretestedand29．42％ werepositive．Thebloodsamples werealsoamplifiedincellculturewhichimprovedthesensitiviytoftheassay．ResultsconfirmedthatthesELISA israpidandspecific． Keywords：Bluetongue；Diagnosis；ELISA；M