杂交玉米种子快速鉴定技术项目建议书.ppt

作物品种鉴定技术的现状和研究进展 作物遗传育种专业 李稳香 0 前言 作物品种鉴定方法 目前用于作物品种鉴定的方法分为： 种子形态鉴定法 快速测定法 培养生长箱测定法 电泳法 DNA指纹技术 田间小区种植鉴定法 研究进展主要在生化和分子检测技术方面 1 种子形态鉴定法 依据：种子形态、大小、表面特征和种子颜色等，如ZB B21001-87 评价：用于鉴定品种的形态特征有限（诸如种子颜色、类型、稃壳颜色等几个形态性状），且这些性状只适用于其品种间差异明显的样品的鉴定，因此，其实用价值并不大。 2 快速测定法 依据：某种特定的化学试剂与种子中特有成分发生反应； 或者种子或幼苗存在荧光物质，利用紫外光照射进行荧光测定。 评价：快速、简单、花费少、重演性。，有时可用于鉴别品种，在大多数情况只能把种子分成几类，再与其他方法结合应用，应用范围较窄 3 培养生长箱测定法 3.1 途径一：给植株提供加速发育的条件，当幼苗达到适宜评价的发育阶段时，进行鉴定。两种方法：①是加速生长。②是减少植株季节性条件的需求。 途径二: 是让植株生长在特殊的逆境条件下，测定不同品种对逆境的不同反应来鉴别不同品种。两种方法：①是控制营养条件。②是对杀菌剂的损伤反应。 3.2评价 鉴定范围比种子形态法和快速法范围明显扩大。花颜色、幼苗色素的差异是质量性状，既可用于真实性的鉴定，也可用于鉴定异型株。 局限性：株高、穗数等数量性状的测定只能用于真实性鉴定，不能用于鉴定异型株。 4 电泳法 4.1 1999版《国际种子检验规程》： 酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳（适用于大、小麦种子）； SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（适用于豌豆属和黑麦草属种子）； 超薄层等电聚焦电泳（适用于杂交玉米种子）； 酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳（适用于燕麦种子）。 4.2 UPOV： 小麦种子高分子量麦谷蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法； 大麦醇溶蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法； 大麦B-和C-醇溶蛋白酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法； 玉米种子同工酶淀粉凝胶电泳方法。4.3 GB/T3543.5-1995:： 大麦、小麦种子的酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳测定方法。 4.4评价：该法比较简单、快速和稳定、重演性较好。但是，由于同工酶和蛋白质是基因表达的产物，产生的多态性不足够多，对某些品种，特别是亲缘关系较近的品种或组合难以鉴别，而且同工酶和蛋白质的表达也易受环境条件的影响。 5 DNA指纹技术 5.1方法 限制性片段长度多态性（RFLP） 随机扩增多态DNA（RAPD） 扩散片段长度并多态性（AFLP） 微卫星重复序列（SSR） 序列标志位点（STS） 5.2评价： 该法具有多态性丰富、灵敏度高，区分鉴别效果好等优点。 目前用于品种真实性和纯度鉴定的方法还很不成熟，同时，从农业生产的角度而言，种子纯度以农艺性状为根本判定依据，那么基因型或DNA指纹的差异是否就对应于农艺性状的差异，或者DNA指纹多态性有差异而农艺性状并没有差异。 6 田间小区种植鉴定法 6.1 小区种植鉴定技术的发展 鉴定方法日趋完善。1969年OECD制定小区种植鉴定方法，1982、1995年全面修订，1997年制定杂交种小区后控鉴定方法； 规范了品种的特征特性。UPOV制定了160个种的DUS检测方法指南，OECD的小区鉴定方法标准附录中列入了简化的品种特征特性； 开展了小区鉴定的比较试验，统一检验员的评判标准。 6.2 评价： 田间小区种植鉴定在今后的一定时期内仍是商品种子品种纯度鉴定的唯一认可的标准方法； 适应范围广，技术简单易行。能适用于所有作物种子，这是其他方法无法想象和比拟的。是最为可靠和准确的方法； 缺点主要是在时间上无法满足种子贸易的验证需要，费工、费时。 * 杂交玉米种子快速鉴定技术项目建议书 制作人：*** 一、杂交玉米鉴定的必要性 二、主要鉴定方法介绍 三、项目目标 四、总结 一、杂交玉米鉴定的必要性 种子是农业生产最基本也是最关键的生产资料。杂交玉米种子的真实性和品种纯度的快速测定在种子生产、加