杧果低分子量热激蛋白基因MiHSP17.6的克隆及表达分析.doc

园艺学报，（）：– 2014411223832392 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 收稿日期：2014–08–19；修回日期：2014–11–14 基金项目：广西自然科学基金项目（2013GXNSFDA019011，2014GXNSFBA118102）；广西高校科研项目（YB2014009）；广西大学科 研基金项目（XBZ120766） * 共同第一作者 M 杧果低分子量热激蛋白基因 iHSP17.6 的克隆 及表达分析 CAN Van Toan1,3,*，罗 聪1,*，董 龙1，刘召亮1，何新华1,2,** （1广西大学农学院，南宁 530004；2广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室，南宁 530007；3北江农林大学林 业系，越南北江） 摘 要：采用RT-PCR与RACE相结合的方法获得了杧果低分子量热激蛋白基因的cDNA全长序列， 命名为 MiHSP17.6 ，GenBank登录号为KJ459857。序列分析显示，该基因序列全长为680 bp，其中开放 阅读框为462 bp，编码154个氨基酸，5′非编码区和3′非编码区长度分别为80 bp和135 bp。杧果MiHSP17.6 与其他物种的低分子量热激蛋白同源性介于74% ~ 82%。实时荧光定量分析表明， MiHSP17.6 在‘四季杧’ 不同组织器官中均表达，在果实发育的中期表达水平持续上升。高温（44 ℃）、低温（4 ）、盐（NaCl）、 聚乙二醇（PEG）、脱落酸（ABA）、双氧水（H2O2）和水杨酸（SA）处理均诱导该基因表达，因此推测 MiHSP17.6 的功能可能与杧果果实发育和抵御逆境胁迫相关。 关键词：杧果； MiHSP17.6 ；克隆；表达分析 中图分类号：S 667.7 文献标志码：A 文章编号：0513-353X（2014）12-2383-10 Cloning and Expression Analysis of a Small Heat Shock Protein Gene （ MiHSP17.6 ）from Mangifera indica CAN Van Toan1,3,*，LUO Cong1,*，DONG Long1，LIU Zhao-liang1，and HE Xin-hua1,2,** （1 Agricultural College ， Guangxi University ， Nanning 530004， China ；2 Guangxi Crop Genetic Improvement and Biotechnology Laboratory ， Nanning 530007， China ；3 Bacgiang Agricultural and Forestry University ， Bacgiang ， Vietnam ） Abstract：The full length sequence of cDNA，small heat shock protein 17.6 gene of mango was cloned by RT-PCR and RACE method，which was named MiHSP17.6 with the GenBank accession number of KJ459857. The results showed that the full-length sequence of MiHSP17.6 is 680 bp and the open reading frame is 462 bp，which encoding a polypeptide of 154 amino acids. The untranslated region（UTR） 5′ and 3′ with the length of 80 bp and 135 bp，respectively. Comparison of the amino acids sequences of homologous HSP proteins from other species indicated that MiHSP17.6 has a range of 74% to 82% identity. The rea