两株表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组鸡痘病毒的构建及其免疫效力.pdf

维普资讯 畜牧兽 医学报 2008，39(3)：327—332 ActaVeterinaria etZootechnicaSinica 两株表达 H9亚型禽流感病毒 HA基因的 重组鸡痘病毒的构建及其免疫效力 刘武杰 ，孙 蕾 ，陈素娟 ，徐忠林 ，刘金彪 ，刘秀梵 ¨ (1．扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室，扬州 225009； 2．中国科学院微生物研究所分子病毒中心，北京 100101) 摘 要 ：将 H9亚型禽流感病毒 (AIV)HA基 因插入到具有新复制非必需区的通用型质粒载体 pP12LS中构建转 移载体 pP12LSH9A，再分别转染预先感染不 同毒力的2种鸡痘病毒 (FPV)282E4株和 LP株 的鸡胚成纤维细胞 ， 经系列蓝斑筛选纯化 ，获得 了2种重组鸡痘病毒(rFPV)，分别命名为 rFPV282—12LSH9A和 rFPV 一12LSH9A。将 这 2株 rFPV在 SPF鸡和带有高水平抗 H9亚型 AIV母源抗体 的商品鸡上分别进行免疫效力试验 。结果：rF— PV282—12LSH9A和 rFPVLP一12LSH9A在 SPF鸡上的排毒保护率均为 100 (10／10)，在商品鸡上的排毒保护率分 别为 88 (23／26)和 92 (24／26)。结果表明获得 了2株在带有抗 H9亚型 AIV高水平母源抗体 的商品鸡上免疫 效力较好 的rFPV。 关键词 ：H9亚型禽流感病毒 ；重组鸡痘病毒 ；母源抗体 ；免疫效力 中图分类号：$852．65；Q784 文献标识码 ：A 文章编号：0366—6964(2008)03—0327—06 ConstructionandProtectiveEfficaciesofTwoRecombinantFowlpoxViruses ExpressingtheHA GeneofH9SubtypeAIV LIU Wu—jie，SUNLei，CHENSu—juan ，XU Zhong—lin ， LIU Jin—biao ，LIU Xiu—fanH (1．AnimalInfectiousDiseaseLaboratory，CollegeofVeterinaryMedicine， YangzhouUniversity，Yangzhou225009，China；2．CenterforMolecularVirology， InstituteofM icrobiology，ChineseAcademyofSciences，Beijing100101，China) Abstract：TheHA gene from subtype H9N2 AIV wasdirectionally inserted into thevector pP12LS，resultingintransfervectorpP12LSH9A ．Then thepP12LSH9A wasused to transfect thechickenembryofibroblastcells，whichwerepre—infectedwithstrain282E4orLPofFPV，re— spectively． After serialblue plaque screening， we obtained two purified rFPVs： rFPV282— 12LSH9A andrFPVLP-12LSH9A．SPF andantibodypositive commercialchickenswereimmu— nizedwiththetworFPVstoinvestigatetheirprotectiveefficacies．Chickensim