油菜花粉粒萌发的荧光观察毕业论文文稿.doc

安庆师范学院生命科学系 毕业论文 题 目 油菜花粉粒萌发的荧光观察 指导教师 龚 莉 届 别 2009 届 学 号 2305107 姓 名 施 晓 丽 油菜花粉粒萌发的荧光观察 施晓丽 指导老师：龚莉 (安庆师范学院生命科学系 安徽 安庆 246011) 摘要：研究目的：油菜是我国人民食用油的主要来源作物之一，在我国经济作物中具有重要作用。多年来，科学工作者们通过杂交育种的方法获得了许多优质高产的油菜新品种。为弥补以往观察方法的不足，本研究试图通过对甘蓝油菜的种内自花授粉，不同油菜品种的种间异花授粉这两组试验进行荧光显微技术观察，详细了解花粉粒在花粉管中的萌发过程，从细胞水平探讨种内、种间杂交的亲和性程度，从而为花粉粒的细胞水平研究提供一些理论参考。研究方法：采用荧光显微镜技术，观察自花授粉、异花授粉下花粉粒的萌发生长情况。研究结果：油菜自花、异花授粉的花粉均能够大量萌发，表现出高度的亲和性。 关键词：油菜；花粉粒；荧光观察 引言 油菜是十字花科植物原产我国，南北广为栽培，四季均有供产 甘蓝型油菜花粉粒赤道面观近圆形或长圆形，极面为三裂圆形，花粉具三个萌发沟，沟较宽，长达近两极，末端稍尖，沟上覆盖有颗粒状物。外壁具明显的网状雕纹。网眼形状不规则，大小不一(图1，2，7，8)，甘蓝型油菜柱头主要由众多的乳突组成，极面呈圆形或长圆形，中间有一条深深下陷的短沟。乳突呈长圆柱形，顶端钝圆(图1,6)。初期乳突生长较短，排列紧密，随着柱头的成熟逐渐伸长，基部膨大，相邻乳突的空间间隔也相应增大。为花粉附着及萌发提供了适宜的场地和条件 。 3.2 自花授粉的花粉在柱头上的萌发 在甘×甘杂交组合中，授粉4小时种内杂交的组合，其花粉已大量萌发，在8小时以后花粉管开始伸长，24小时后全部萌发。由此可见油菜自花授粉亲和度高。但是在种内杂交中，发现有一小部分甘蓝型油菜柱头上萌发的花粉粒不能进入柱头，通过观察发现此时的花粉柱头没有开裂，花粉管也没有伸长。 3.3 异花授粉的花粉在柱头上的萌发 在种间杂交组合中，授粉2小时以后，柱头上的花粉已有部分开始萌发，花粉粒的三个萌发孔清晰可见，8小时以后花粉管开始伸长，24小时后全部萌发。由此可见油菜异花授粉亲和度高。但也发现了少数在自花授粉中出现的情况：少数花粉粒不能萌发。通过观察也发现花粉柱头没有开裂，花粉管没有伸长。 3.4 花粉管与乳突细胞的相互作用 据荧光显微镜的观察，在异花授粉的乳突表面上，可清晰看到与花粉管接触处，乳突细胞表面出现绉缩、松弛以及“腐蚀”斑点。综合我们的荧光观察，我们认为花粉管应该是通过溶解乳突细胞壁(纤维素——果胶层)而进入到柱头，有生活力的花粉粒长出的花粉管在花柱中伸长,发出黄绿色荧光,清晰可见,且各花粉管在花柱中生长的长度参差不齐，而没有生活力未萌发的花粉粒及花柱的其他组织没有荧光。 小结与讨论 本研究利用荧光显微镜技术，同步观察了油菜自花、异花花粉授粉后在柱头上的萌发生长情况，由于试验中没有等去雄的雌蕊柱头全部开裂就进行了人工授精，致使试验过程中观察到一小部分的未萌发花粉。为能更好地证明油菜花粉自交的高度亲和性，本试验还有待改进，例如：在人工去雄套袋后不要立即进行试验，等雌蕊柱头全部开裂后再进行人工授精，或者将试验分成两组，一组雌蕊柱头全部开裂后授精，另一组雌蕊柱头没有开裂时授精，由此对比最终的试验结果。 其次，在本次试验过程中观察和拍摄到的花粉管在柱头中萌发的照片很少，成为了本次试验的重大遗憾。分析原因，可能由于投手切片技术不够熟练，切片较厚，使压片不够均匀，影响到观察结果；也可能由于授精后取材时间比较偏早，致使很难观察到花粉管在柱头中伸长的过程。 采用荧光显微镜技术，在WU激发下花粉发出黄绿色荧光，能够清晰的看见花粉粒的三个萌发孔，花粉管在花柱内穿行时产生大量的胼胝质，产生强烈的荧光，因此，采用荧光显微镜法能快速测定植物授粉的亲和性，可以弥补以往传统试验的不足。 致谢: 本论文是在龚莉老师的悉心指导下，由本人独立完成。在此过程中还得到许远老师的指导及丁小凤同学的帮助，在此特表示衷心感谢。 参考文献 [1] 肖朋，常桂菊，王保仁.油菜异源花粉在柱头上萌发过程观察[J].中国油料，1995，（2）. [2] 孟金陵.甘蓝型油菜与近缘种、属杂交时花粉---雌蕊相互作用的研究[J].作为学报，1990，（16）. [3] 曾佩玲.油梨的花药发育和花粉粒形成[J].广西热作科技，1998，（2）. [4] 魏建和，马风杰，