红树林来源Streptomyces+sp.OUC6819中Drimentines类化合物生物合成分析.pdfVIP

株丧失了产生Drimentines 类化合物的能力，证明driB基因在Drimentines 生物 合成中是必须的。 4.进行了 Drimentines 生物合成基因簇的异源表达研究。将可能包含 Drimentines 整个生物合成基因簇的Cos4 经不同程度的修饰改造之后，通过接合 转移导入天蓝色链霉菌（Streptomycescoelicolor）M1152 之中，将接合子用放线 菌Ⅱ号、R2YE 及稀有培养基进行发酵，所得发酵产物进行HPLC 分析，但未检 测到Drimentines 类化合物或其结构类似物的产生，推测有可能是基因未表达， 或基因簇不完整。 5.初步研究了driM基因的体外催化活性。生物信息学分析表明，driM可能 与Drimentines 中二酮哌嗪结构的合成相关。将driM重组表达质粒导入E.coli CodonPlus(DE3)中，在16℃，0.4mM IPTG 诱导条件下，实现了可溶性表达，纯 化后，初步检测了其催化活性。对几种检测的氨基酸催化活力进行比较发现， DriM 具有比较广泛的底物识别能力，在高浓度底物时，DriM 对所测底物都表现 出了催化活力。 以上研究结果为进一步展开Drimentines 生物合成研究，进而采用组合生物 合成及代谢工程策略实现Drimentines 的结构多样化