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抗人CD加单抗5CI1抗原识别表位的初步研究 中文摘要
中文摘要
本课题以本所自行成功研制的鼠抗人CD40激发型单克隆抗体5CIl为研究对
象，借助计算机辅助分子设计与蛋白质空间结构模拟技术，利用抗原．抗体相互作
用原理，计算机模拟得到抗原CD40与抗体5C1l的主要结合位点，从而推测出抗
体识别的抗原表位；结合文献报道的CD40一CD40L互相作用位点，通过定点突变
技术、构建突变体基因转染细胞株等生物学实验方法，验证计算机模建结果的可
靠性，从而确定抗体识别的抗原表位，对5CI1抗体进行人源化改造或研制抗人
CD40抗体临床用药具有理论和潜在的临床意义。
目的：通过计算机模拟与生物实验，初步确定本所研制的抗人CD40激发型
单抗5CI1识别的抗原表位。
方法：利用InsightII软件分别模拟抗原、抗体结构，以及搭建抗原抗体复合
物模型，通过计算并推测抗体所识别的抗原表位。通过RT-PCR的方法分别获得
人野生型CD40(wtCD40)和70位突变(70muCD40)及114位突变(114muCD40)
14muCD40并进行鉴定；脂质体转染法将重组表达载体导入
和plRES2．EGFP／I
Blot
法比较5C1 14muCD40
基因转染细胞株的结合。
l
结果：(1)搭建合理的抗原CD40胞外段与抗体5C1Fv结构的复合物模型。
HEK293／70muCD40和HEK293／11
平均荧光强度有减弱的趋势；Westernblot检测结果表明5C11仅识别
14muCD40。由此表明
5C1
1识别HEK293／70muCD40和HEK293／114muCD40的能力降低。
结论：预测5C1
14muCD40基因转染
中文摘要 抗人CD40单抗5CIl抗原识别表位的初步研究
细胞株，证实人CD40序列的第70位苏氨酸和第114位谷氨酸是其单抗5C11识
别的抗原表位，同时验证了计算机模建及预测结果的可靠性，为今后5C11抗体人
源化改造的计算机辅助分子设计与实验研究奠定了良好的基础。
【关键词l CD40；抗原表位：同源模建；定点突变；
作 者：张婷
指导教师：张学光教授
ofthe of
Preliminarystudy antigenicepitope
anti--humanCD40monoclonal l
antibody(5c0
Abstract
Thisissuewas onthehumanCD40 mousemonoclonal
based antagonist antibody
1 uS．Themain sitesbetweenCD40and 5C11 were
(5c1)by binding antigen antibody
obtainedthemeansof A
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