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目 录
摘要……………………………………………………………………………………I
Abstract…………………………………………………………………………………………………………．V
第一章 综述………………………………………………………………………．1
1．1．丝状真菌全局性调控因子LaeA……………………………………………1
1．1．1全局性调控因子LaeA的发现………………………………………．1
1．1．2
LaeA对丝状真菌的全局性影响……………………………………．．2
1．1．3
LaeA是一种毒力因子………………………………………………4
1．1．5
LaeA其他方面的研究………………………………………………．．7
1．1．6橘青霉中LaeA………………………………………………………．7
1．2丝状真菌LaeA相互作用蛋白的研究……………………………………．．7
1．2．1
Lae～VeAvelB三聚复合体的发现…………………………………8
1．2．2
LaeA相互作用蛋白的研究进展……………………………………．．8
1．3．常用蛋白相互作用方法……………………………………………………10
1．3．1酵母双杂交…………………………………………………………．10
1．3．2
GST．puUdown技术…………………………………………………10
1．3．3免疫共沉淀技术……………………………………………………．11
1．3．4．串联亲和纯化技术…………………………………………………11
第二章 绪论………………………………………………………………………13
2．1研究意义……………………………………………………………………13
2．2课题的提出…………………………………………………………………13
2．3研究内容……………………………………………………………………13
2．4技术路线……………………………………………………………………14
第三章实验材料与方法……………………………………………………………15
5
3．1实验材料……………………………………………………………………1
5
3．1．1菌株与质粒…………………………………………………………．．1
3．1．2培养基………………………………………………………………．．15
3．1．3抗生素………………………………………………………………．．15
表3．1．实验所用抗生素……………………………………………………16
3．1．4本课题中所用引物…………………………………………………．16
3．1．5实验试剂……………………………………………………………．16
3．1．6主要仪器……………………………………………………………．17
3．2实验方法……………………………………………………………………17
第四章实验结果与分析……………………………………………………………31
4．1 1
LaeA与VeA体外相互作用探究…………………………………………．．3
1
4．1．1异源共表达原理………………………………………………………3
4．1．3
LaeA与VeA共表达载体构建………………………………………33
4．1．4
LaeA与VeA共表达蛋白纯化………………………
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