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生物化学 蛋白质二级结构.ppt
蛋白质的二级结构 肽平面 肽键的特殊性质 蛋白质的二级结构 背景知识 肽键具有部分双键性质。 充分意识到氢键在蛋白质结构中的重要作用。 X-射线晶体学研究表明组成头发和豪猪刺的蛋白质的空间结构里存在重复结构。 氨基酸序列对? -螺旋结构结构的影响 两种?-折叠方式 (三)?-转角 (四)无规则卷曲 蛋白质的超二级结构 结构域 蛋白质的三级结构 总结 一个残基的改变为什么会带来如此大的变化呢? 自然状态下,二价铁极易被氧化为三价铁,为什么在肌红蛋白血红素辅基中的二价铁和氧结合后却没变成三价铁? 自然状态下,血红素辅基和CO的结合能力是其和O2结合的20000倍,但是在肌红蛋白中却只有200倍,为什么? 血红蛋白 T态和R态 T态向R态转变因素 * 变构效应(allosteric effect) 一个寡聚体蛋白质的一个亚基与其配体结合后,能影响此寡聚体中另一个亚基与配体结合能力的现象,称为变构效应。 像血红蛋白这种具有变构效应的蛋白质称为变构蛋白(allosteric protein)。 变构效应(allosteric effect) 变构效应:蛋白质与配体结合改变蛋白质的构象,进而改变蛋白质生物学活性的现象。 氧结合曲线 91 93 94 95 求职应注意的礼仪 求职时最礼貌的修饰是淡妆 面试时最关键的神情是郑重 无论站还是坐,不能摇动和抖动 对话时目光不能游弋不定 要控制小动作 不要为掩饰紧张情绪而散淡 最优雅的礼仪修养是体现自然 以一种修养面对两种结果 必须首先学会面对的一种结果----被拒绝 仍然感谢这次机会,因为被拒绝是面试后的两种结果之一。 被拒绝是招聘单位对我们综合考虑的结果,因为我们最关心的是自己什么地方与用人要求不一致,而不仅仅是面试中的表现。 不要欺骗自己,说“我本来就不想去”等等。 认真考虑是否有必要再做努力。 必须学会欣然面对的一种结果----被接纳 以具体的形式感谢招聘单位的接纳,如邮件、短信 考虑怎样使自己的知识能力更适应工作需要 把走进工作岗位当作职业生涯的重要的第一步,认真思考如何为以后的发展开好头。 Thank you 当亚铁离子移动时,它同时拖动His F8残基,进一步导致蛋白质的构象发生改变。 肌肉 蛋白质的理化性质与分离纯化 The Physical and Chemical Characters and Separation and Purification of Protein (一)蛋白质的两性电离 一、理化性质 蛋白质分子除两端的氨基和羧基可解离外,氨基酸残基侧链中某些基团,在一定的溶液pH条件下都可解离成带负电荷或正电荷的基团。 * 蛋白质的等电点( isoelectric point, pI) 当蛋白质溶液处于某一pH时,蛋白质解离成正、负离子的趋势相等,即成为兼性离子,净电荷为零,此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。 (二)、蛋白质胶体的性质 蛋白质溶液有许多高分子溶液的性质,如:扩散慢、易沉降、 粘度大、不能透过半透膜,在水溶液中可形成亲水的胶体。 ????蛋白质胶体溶液的稳定因素:水化膜、带电荷。当破坏这两个因素时,蛋白质中从溶液中析出而产生沉淀。 ?(三)、蛋白质的变性作用(denaturation) 1、蛋白质变性的概念:天然蛋白质受物理或化学因素的影响后,使其失去原有的生物活性,并伴随着物理化学性质的改变,但并未导致其一级结构的变化,这种作用称为蛋白质的变性。 2、使蛋白质变性的因素 (1)物理因素:高温、高压、射线等 (2)化学因素:强酸、强碱、重金属盐等 3、变性的本质: 分子中各种次级键断裂,使其空间构象从紧密有 序的状态变成松散无序的状态,一级结构不破坏。 4、蛋白质变性后的表现: (1)生物学活性消失(2)理化性质改变:溶解度下降,粘度增加,紫外吸收增加,侧链反应增强,对酶的作用敏感,易被水解。 (四 )蛋白质的紫外吸收光谱 蛋白质在远紫外光区(200-230nm)有较大的吸收,在280nm有一特征吸收峰,可利用这一特性对蛋白质进行定性定量鉴定。 蛋白质质量浓度/(mg/ml)=1.55A1cm - 0.76A1cm 280 260 测定范围:0.1~0.5mg/ml (五)蛋白质的呈色反应 ⒈茚三酮反应(ninhydrin reaction) 蛋白质经水解后产生的氨基酸也可发生茚三酮反应。 ⒉双缩脲反应(biuret reaction) 蛋白质和多肽分子中肽键在稀碱溶液中与硫酸铜共热,呈现紫色或红色,此反应称为双缩脲反应,双缩脲反应可用来检测蛋白质水解程度。但是双缩脲不与二肽反应。 蛋白质纯化与鉴定的常用方法 层析 整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置。即肽链中所有原子在三维空间的排布位
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