人骨髓间充质干细胞及在骨组织工程应用的实验分析.pdfVIP

P 020s05 人骨髓间充质干细胞及其在骨组织工程应用的实验研究 The characteristicsof stem biological mesenchymal cellsfromhumanbonemarrowandits for application bonetissue engineering 博士研究牛 赵宇 戚可名 副导师 陆应麟 乔群 申请学位 博士 学科专业 整形外科 研究方向 组织移植 中国医学科学院 整形外科医院 中国协和医科大学 人骨髓闽充质千细胞及其在骨组织工程应用的实验研究 博士研究生： 赵宇 导 师： 戚可名教授 副导师：陆应麟教授’ 乔群教授 100850 中国医学科学院整形外科医院，北京100041；军事医学科学院基础医学研究所，北京 中文摘要 stem cell，MSCs)是骨髓中存在的一种具 骨髓间充质干细胞(mesenchymal 有多分化潜能和高度增殖能力的多能干细胞。在特定的条件下，其能够被诱导 分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌细胞、肝卵圆细胞甚至神经胶质细 胞。骨髓问充质干细胞具有下列优点：穿刺取材容易；细胞体外分离培养方法 简单；体外培养增殖力强，并定向分化为研究所需的细胞表型；因而骨髓问充 质干细胞是目前组织工程(尤其骨组织工程)研究较多的种子细胞。我们通过 开展人MSCs的细胞生物学特性、定向诱导分化(如：MSCs分离培养、诱导分 化的条件、基因转染的影响)以及其在骨组织工程中应用的实验研究，为临床 组织工程化人工骨的移植提供了的理论与实验的研究基础。 本研究的内容包括：人MSCs的生物学特性与定向诱导分化：逆转录病毒 载体介导的EGFP基因转染人MSCs；骨髓问充质干细胞在骨组织工程中应用等 几个方面。 1、人骨髓间充质干细胞的生物学特性 Stem 目的：体外分离培养人骨髓间充质干细胞(MesenchymalCells，MSCs)， 研究其一般的生物学特性如细胞生长特点、增值周期、细胞表面分子特点，为 其作为组织工程的种子细胞提供理论基础。方法：①运用密度梯度离心方法 Percoll)分离获得骨髓单个核细胞，应用含10％胎牛血清(经筛选) (1．0739／ml 的L--DMEM体系中培养，除去非贴壁的细胞、进行分离纯化与体外培养从而 获得较高纯度的MSCs。研究表明人MSCs为梭形，呈集落样生长。第2～8代 细胞生长速度较快，8代以后细胞扩增速度变慢，细胞形态也发生改变，有的呈 多角形；