第四讲_果实成熟.ppt

谢谢! 三　细胞壁水解酶与果实软化 细胞壁组成成分,结构 细胞壁合成，生长与功能 细胞壁相关水解酶与果实软化 细胞壁组成成分,结构与特性(1) 细胞壁的组成成分 构成细胞壁的成分中，90%左右是多糖，10%左右是蛋白质、酶类以及脂肪酸等.细胞壁中的多糖主要是纤维素、半纤维素和果胶类，它们是由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸等聚合而成 . 纤维素 是β—(1，4)无分枝多聚葡萄糖。对细胞壁的延展性起主导作用。多条纤维素链靠分子内氢键构成微纤丝，在细胞壁上与半纤维素构成网络结构。 果胶 是一组多糖类物质，存在于初生细胞壁和细胞间隙中。 果胶分子是由α—(1—4)连接的D—半乳糖醛酸组成． 分为果胶酸、果胶和原果胶 果胶酸(pectic acid) 由约100个半乳糖醛酸通过α-1，4-键连接而成的直链。 水溶性，很容易与钙起作用生成果胶酸钙。它主要存在于中层中. 果胶(pectin) 果胶是半乳糖醛酸酯和少量半乳糖醛酸通过α-1，4-糖苷键连接而成的长链高分子化合物，分子量在25 000～50 000之间，每条链含200个以上的半乳糖醛酸残基。 果胶能溶于水，存在于中层和初生壁中，在细胞质或液泡中也有存在。 原果胶(protopectin) 分子量比果胶酸和果胶大，主要存在于初生壁中， 不溶于水，在稀酸和原果胶酶的作用下可转变为可溶性的果胶。 细胞壁结构蛋白 富烃脯氨酸蛋白（hydroxy-proline-rich glycoprotein,HRGP） 富脯氨酸蛋白（proline-rich protein,PRP ） 富甘氨酸蛋白（ glycine-rich-protein,GRP ） 伸展蛋白（extensin） 初生壁的“经纬”模型 初生壁是由两个交联在一起的多聚物——纤维素的微纤丝和穿过微纤丝的伸展素网络交织而成，悬在亲水果胶——半纤维素胶体中。 在这个交织结构中，微纤丝是经(warp)，平行于壁的平面排列；而伸展素“纬”(weft)，垂直于壁的平面排列. ２, 细胞壁合成，生长与功能（１）　合成与生长 合成细胞壁的场所在内质网和高尔基体 所合成的壁成分运输:由高尔基体分泌小泡运输，小泡运至质膜并与膜融合，小泡中成壁物质被释放至壁中。 成壁物质的合成过程受核基因控制，并能被IAA等激素诱导. （２）, 细胞壁的功能 维持细胞形状，控制细胞生长 物质运输与信息传递 防御与抗性 ３．细胞壁相关水解酶与果实软化（１）　种类 参与果胶与纤维素,半纤维素降解的酶类主要有 多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG), 果胶甲基酯酶(pectinesterase, PE 或pectin methylesterase PME), 木葡聚糖内糖基转移酶(xyloglucan endotransglycosylase, XET), β-半乳糖苷酶(β-galactosidase), 纤维素酶(cellulase), 扩展蛋白(expansin)等. PG ?PG位于细胞壁上,主要负责催化果胶降解 可将果实细胞壁中多聚半乳糖醛酸酶降解为半乳糖醛酸，使细胞壁结构解体，导致果实软化 . ? 证据： 果实软化速度与PG活性正相关. PG可引起细胞壁降解 不能正常软化的番茄果实突变体中PG活性缺失或微量. 未成熟的绿果中检测不出PG活性. 目前已从桃、猕猴桃、苹果、西洋梨、沙梨、鳄梨、等植物中克隆到PG的编码基因。 PE 其存在没有组织特异性. 作用: 对细胞壁中高度甲酯化的多聚半乳糖醛酸进行去酯化作用,脱去半乳糖醛酸羧基上的甲氧基,从而使多聚半乳糖醛酸链易于被PG降解. 证据： 目前，已从桃、番木瓜、番茄、西瓜等植物中得到其编码基因。 用PE?反义基因导入番茄果实中，PE的活性大大降低，仅为对照的10%或更低。转基因果实与普通番茄果实相比，果胶分子量较大，甲酯化程度较高。 β-半乳糖苷酶 作用于富含半乳糖的果胶,催化以半乳糖残基为末端的多糖,糖蛋白和半乳糖酯的水解,为代谢和生长释放游离的半乳糖和贮存能量. 可以使细胞壁的一些组分变得不稳定，它可以通过降解具支链的多聚醛酸，从而使其果胶降解或溶解。 证据： ? β-半乳糖苷酶在猕猴桃、芒果、甜樱桃等果实的成熟软化过程中起作用， 目前已从番茄、苹果和梨等植物中克隆到了β-半乳糖苷酶基因。 纤维素酶(cellulase), 主要切断细胞壁中各种基质成分的交联,降低细胞壁强度,使细胞壁膨胀松软. 证据： 鳄梨纤维素酶活性随果实成熟度增加而显著增加 . 从番茄中已克隆出两种结构不同的纤维素酶基因cel?1和cel?2 ,但这两种纤维素酶与果实软化并无明显关联，对果实中乙烯的合成也没有影响。 纤维素酶的不同酶型在果实中的表达特点，各类果实中纤维素酶的同源