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内切型菊粉酶酶学性质的研究 王春 ，曹泽虹 ，董玉玮，高兆建，陈阔，李雪晴，王娟 (徐州工程学院食品 (生物)工程学院，江苏省食品资源开发与质量安全重点建设实验室，江苏省食品 与生物工程实验中心，徐州 221008) 摘 要 ：以食品与生物工程实验中心酶工程实验室保藏的黑曲霉菌种作为菌源，利用黑曲霉细胞深层发 酵法生产内切型菊粉酶。通过测定发酵液酶活，从20株黑曲霉菌株中筛选得到产菊粉酶活力最高的编号为 E133131的一株黑曲霉菌株 ，酶活为0．66Um／L。对黑曲霉E133131号菌株所产内切型菊粉酶进行了酶学性质 的研究，得到以下结论 ：最适pH为4．5；最适温度为60~C ；最佳底物浓度为4mmolL／；米氏常数 (Km)为 1．434mmolL／；Ca2对内切型菊粉酶有激活作用，当加入浓度为 1．5mmol／L的Ca2时，使酶活从 0．66Um／L提 高到 1．09U／mL Mn2、Cu 和 Mg 对内切型菊粉酶有抑制作用 ，其中c 的抑制作用最大，使酶活从0．66U／ mL降低到0．095U／mL；Na+、 、Zn2、Fe 、Mg 对 内切型菊粉酶的酶活影响不大；pH在 4．5～8．0范围内， 温度在 50～60~C之间，内切型菊粉酶的酶活力较稳定。 关键词：内切型菊粉酶；酶学性质 ；黑曲霉 ；底物浓度；米氏常数 中图分类号：TS201．3 文献标识码 ：A 文章编号 ：1006—2513(2015)03—0119-08 Fermentationproductiontechniqueoptimalizationofendo——inulinaseby responsesurfaceanalysis WANGChun，CAOZe-hong，DONGYu—wei，GAOZhaoqian，CHENKuo，LIXue—qing， WANG Juan (CollegeofFood(Biology)Engineering，XuzhouInstituteofTechnology，JiangsuKeyConstruction LaboratoryofFoodResourceDevelopment，QualityandSafeyt，JiangsuExperimentCenterofFoodand BiologicalEngineering，Xuzhou 221008) Abstract：Thisexperimentregardsaspergillusstrainspreservedbyenzymeengineeringlaboratoryasasourceof bacteria，theaspergillusnigertypecuttinginsideinulinaseproducedbyenzymaticpropertieswerestudied．Of20strains ofaspergillusstrainsscreeninginthefirstplace，theenzymeactivitycanbedeterminedthroughfemr entationcultivation， finallyselectedoneofthehighestenzymeactivitystrainE133131．theenzymeactivityofO．66U／mL．Researching aspergillusnigerE133131strainsproducedinulinaseenzymologyproperties，getthefollowingconclusion：theoptimum pH iS4．5，hteoptimum temperaturewas60℃ ，thebestsubsrtatecoffcentrationfor4mmoI／L。andmichaelisconstant (Km)isatendencyfor1．434mmol／L，ca ontheinulaseactivationfunction，whentheconcentrationofjoin tendencyofr1．