双水相木聚糖酶水解体系制备木二糖及其纯化.pdfVIP

第 35卷第 5期 化 学 与 工 业 V0l_35No．5 2015年 10月 IndustryofForestProducts 0ct．2015 doi：10．3969／j．issn．0253-2417．2015．05．015 双水相木聚糖酶水解体系制备木二糖及其纯化 李 鑫，顾夕梅，绳敖楠，张 丽，陈晓佩，勇 强 (南京林业大学化学工程学院，江苏 南京 210037) C 摘 要： 采用聚乙二醇6000／柠檬酸钠的双水相木聚糖酶水解体 系制备木二糖 ，以10g／L桦木木 r 聚糖为底物，木聚糖酶的酶用量为20IU／g(以木聚糖质量计)，在 50~C、pH值 5．6条件下，水解 8h 林 制备木二糖，木二糖的酶解得率为 13．8％。双水相水解体系对木聚糖酶回收率为66．4％，对木二糖 LIXin y 回收率为87．2％；采用凝胶层析纯化方法，以葡聚糖凝胶 LH-20为分离介质，脱气超纯水为洗脱剂， 产 a 在柱温35℃、洗脱溶剂流速0．1mlMmin、上样量 0．3mL条件下，分离纯化木二糖，木二糖纯度为 98．5％。 d 关键词： 木聚糖酶；双水相体系；酶水解；凝胶层析；木二糖 中图分类号：TQ35；Q556 文献标识码：A 文章编号：0253—2417(2015)05—0093-05 引文格式：李鑫，顾夕梅，绳敖楠，等．双水相木聚糖酶水解体系制备木二糖及其纯化 [J]．林产化学与工业，2015，35(5)：93—97 PreparationofXylobiosebyXylanaseHydrolysisinAqueous Two—phaseSystem andItsPurification LIXin，GUXim·ei，SHENGAo—nan，ZHANGLi，CHENXiao—pei，YONGQiang (CollegeofChemicalEngineering，NamingForestryUniversity，Nanjing210037，China) Abstract：XylobiosewaspreparedbyxylanasehydrolysisofbirchwoodxylaninthePEG6000／sodium citrateaqueoustwo—phase system (ATPS)．TheoptimizedconditionsforenzymatichydrolysisinATPSwerebirchwoodxylan10g／L，xylanase20IU ／g (calculatedbythemassofxylan)，50oCandpH5．6．TheenzymatichydrolysisyieldofxylobioseWas 13．8％ for8h．The recoveriesofxylanaseandxylobiosewere66．4％ and87．2％ ．respectively．Th en．purificationofxylobioseWas carriedouton SephadexLH-20withusingdegassedhighpurifiedwateraseluent．Theoptimizedconditionsforpurificationofxylobiosewere columntemperature35oC，0．1mL／minandsamplevolume0．3mL．Afterpurification，thepurityofxylobiosewasimprovedto 98．5％ undertheoptimizedconditions． Keywords：xylanase；aqueoustwo—phasesystem ；enzymatichydrolysis；gelchromatography；xy