醉茄素A对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡及P13K／Akt信号通路的影响.pdfVIP

志 2014年 2月第 19卷第 2期 ChineseClinicalOncolo~ ．Feb．2014．Vo1．19．No．2 · 107 · 醉茄素 A对非小细胞肺癌 A549细胞增殖、凋亡及 PI3K／Akt信号通路的影响 200433 上海 同济大学附属上海市肺科医院放疗科 蔡 勇，王季颖 【摘 要】 目的 探讨醉茄素A(WFA)对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖、凋亡及 PI3K／Akt信号通路的影响。 方法 采用0、2．5、5．0、10．0、20．Op~mol／LwFA处理A549细胞 ，采用四甲基偶氮唑盐(MTF)比色法检测上述浓度处理24、48、 72和96h的细胞增殖抑制率，Hoechst染色和磷酯酰丝氨酸结合蛋白．异硫氢酸荧光素／碘化丙啶双染法 (AnnexinVFITC／PI) 检测各浓度组48h的细胞凋亡情况，流式细胞仪检测各浓度组48h的细胞周期分布情况，免疫印迹检测各浓度组48h凋亡相 关基因(Bcl-2、Bax和Cleavedcaspase一3)和PI3K／Akt信号通路重要蛋白Akt及其磷酸化形式 p-Akt的蛋白水平。结果 WFA 可抑制细胞增殖，并呈剂量和时间依赖性(P0．05)；0、2．5、5．0、10．0、20．0lxmol／LWFA作用48h后A549细胞的凋亡指数分 别为2．75~0．64、4．61~1．36、9．75~2．78、12．92-+3．42和 18．68~4．31，组间差异有统计学意义 (P0．05)。除 2．5p~moL／L外，其 余浓度组的早、晚期凋亡率 、凋亡促进基因(Bax和Cleavedcaspase-3)水平及 G。／G 期细胞 比例均高于0p~mol／L，凋亡抑制基 因Bcl一2水平及 S期和G2／M期细胞比例均低于01~mol／L(P0．05)；2．5、5．0、10．0、20．Ol~mol／L的组间差异有统计学意义 (P 0．05)。随着浓度升高，p-Akt／Akt值呈降低趋势，差异有统计学意义(P0．05)。结论 WFA能够抑制 A549细胞的增殖及 凋亡 ，可能通过抑制 PI3K／Akt通路激活实现。 【关键词】 WithaferinA；非小细胞肺癌； 增殖； 凋亡；PI3K／Akt信号通路 中图分类号：R734．2 文献标识码 ：A 文章编号：1009-0460(2014)02-0107-05 InfluencesofwithaferinA on proliferation．apoptosisandPI3K ／Aktsignalingpathwayofnon-smallcell lungcancerA549cell cA，y0 ，WANGflying．DepartmentofRadiationOncology，PulmonaryHospital，TonejiUniversity， Shanghai200433．China 【Abstract】Objective ToexploretheinfluencesofwithaferinA(WFA)onproliferation，apoptosisandPI3K／Aktsignaling pathwayof／Ionsmallcelllungcancer(NSCLC)A549cel1．Methods TheA549cellsweretreatedwithdifferentconcentrationsof WFA (0，2．5，5．0，10．0，20．0p~mol／L)．TheMTrassaywasusedtomeasuretheproliferationinhibitionratesat24，48，72and 96htreatedwithdifferentconcentrationsofWFA．TheHoechststainingandAnnexinV—FITC／PIdoublestainingwereemployedtode- teetcellapoptosisaftertreatmentwithdifferentconcentrationsofWFA．Thecycledistributionat48haftertreatmentwithWFAwasde— tectedbyflowcytometry．TheWesternblottingwasusedtomeasuretheproteinlevelsofapopt